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第 31卷 第 7期 中 南 林 业 科 技 大 学 学 报 Vo1．31 No．7
2011年 7月 JournalofCentralSouthUniversityofForestry Technology Ju1．2011
绵毛优若藜冷胁迫均一化全长 cDNA文库的构建
明付焕，张党权，宋志丹，谷振军，祝全东，韩 欣，郭林林
(中南林业科技大学 国家林业局栽培与育种重点实验室，湖南 长沙 410004)
摘 要：以绵毛优若藜叶片和嫩茎为材料，对盆栽的绵毛优若藜小苗进行梯度低温胁迫处理后 ，采用 SMART
(switchingmechanismat5endofRNAtranscript)与DSN(duplex-specificnuclease)均一化相结合技术构建绵毛优若
藜冷胁迫均一化全长eDNA文库。经测定，原始文库的库容量为 1．4X10pfu。PCR检测结果显示：插入片段的长度
在0．5～3kb之间，平均大于 1kh，表明文库构建效果较好。该文库包含有大量的未知基因，有待进一步的发掘和研
究。
关键词：绵毛优若藜；全长 eDNA文库；均一化；冷胁迫 ；抗逆基因
中图分类号：Q785 文献标志码：A 文章编号：1673—923X(2011)07—0169—05
Constructionofcold-induciblenormalizedfull—lengthcDNA
libraryofCeratoideslanata
MING Fu-huan，ZHANG Dang-quan，SONGZhi-dan，GU Zhen-jun，ZHU Quan-dong，HAN Xin，GUO Li 1in
(TheKeyLabofNon-woodForestProductsofStateForestryAdministration，
CentralSouthUniversityofForestryandTechnology，Changsha410004，Hunan，China)
Abstract：Takingtheleavesandyoungstemsasmaterial，anormalizedfull-lengtheDNA libraryofCeratoideslanata
wasconstructed．TheseedlingsofpottedCeratoideslanataweretreatedbygradientcoldstress，normalizedfulb
lengtheDNA librarywassuccessfullyconstructedbyDSN (duplex-specificnulease)——normalizationcombinedwithSM——
ARTTM (switchingmechanism at5endofRNA transcript)technique．Theresultsshow thatthecapacityofthepri—
marylibrarywas1．4×10 pfu．ThePCR resultsshow thattheinsertionsizewasbetween0．5kband3．0kb，aver—
agelyabout1．0kb，suggestingthattheeDNA librarywaswellnomr alizedandhadbeenestablishedsuccessfully．The
analyticresultsuggestedthatthiseDNA librarycontainslargenew genes，whichneedfurtherresearchesandfunction—
alanalysis．
Keywords：Ceratoideslanata；full-lengtheDNA library；nomr alization cold-stress；stress-resistantgenes
绵毛优若藜 Ceratoideslanata，又称优若
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