葡萄糖对人骨髓间充质干细胞增殖的影响及调控机制.pdfVIP

第 40卷第 5期第 562页 华 中科技大学学报 (医学版) Vo1．40 No．5 P．562 2011年 10月 ActaMedUnivSeiTechnolHuazhong oct． 2O11 葡萄糖对人骨髓问充质干细胞增殖的影响 及调控机制 王琳芳 ， 龚 娟 ， 邓 波 ， 李裕 明。△ 华 中科技大学同济 医学院附属协和医院 急诊科 ， 内分泌科 ，武汉 430022 摘要 ：目的 观察不同浓度葡萄糖对人骨髓问充质干细胞 (humanmesenchymalstemcells，hMscs)增殖 的影响，并 初步探讨其可能的基因调控机制。方法 hMSC—TERT细胞在不 同浓度葡萄糖 (5．6、11．0、25．0mmol／L)培养液 中，分 别培养 14、28d后，用 MTT法测定各组 hMSCTERT细胞的增殖率，基因芯片检测 hMsc—TERT细胞在高浓度葡萄糖 (25．0mmol／L)与生理浓度葡萄糖(5．6mmol／I)作用下基因谱 的差异性表达 ，并用 RT-PCR扩增技术进一步证实不同 浓度葡萄糖作用下 的hMSC—TERT细胞硫氧还蛋 白相关蛋 白(TXNIP)mRNA表达 的差异 结果 细胞增殖测定结果 显示随着葡萄糖浓度的增加以及培养时间的延长 ，hMSC—TERT细胞的增殖率下降。同时基 因芯片测定筛选 出表达差 异的基因有 87条 ，其中 12条表达上调 ，75条表达下调 。在表达上调的基 因中，TXNIP基因表达增加最为显著。RT— PCR结果也进一步证实在相 同培养时间下，与 5．6mmol／L葡萄糖浓度组相 比，11．0mmol／L和 25．0mmol／L葡萄糖浓 度组TXNIPmRNA表达均明显增加(均P0．01)；25．0mmol／~组较 11．0mmol／L组TXNIPmRNA表达增加，但差 异无统计学意义(P0．05)。在 5．6mmol／L葡萄糖浓度组，培养 28d时TXNIPutRNA水平较培养 14d时明显增加 (PO．01)；在 l1．0mmol／L和 25．0mmol／L葡萄糖浓度组间，培养至 14d与 28d后 ，TXNIPmRNA水平 的改变差异 均无统计学意义(P0．05)。结论 高糖环境 中hMSC—TERT细胞 的增殖能力下降，TXNIPmRNA 的表达增加调节 hMSCTERT细胞增殖能力的改变 。 关键词 ：骨髓 间充质干细胞 ； 葡萄糖 ； 细胞增殖 ； 基因芯片 ； 硫氧还蛋白相关蛋 白 中图分类号 ：R587．1 DOI：10．3870／j．issn，1672—0741．2011．05．015 EffectsofGlucoseonProliferationofHumanMesenchymalStem Ceils andPossibleM echanism WangLinfang ，GongJuan。，DengBo etal DepartmentofEmergencySurgery，。DepartmentofEndocrinology，UnionHospital，Tongji MedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan430022，China Abstract Ohieetive Toinvestigatetheeffectsofglucoseonhumanmesenchymalstem cells(hMSCs)proliferationandthe possiblemolecularmechanism．Methods hMSC—TERTcellsweregrowneitherin5．6orl1．0or25mmol／Lglucosefor14and 28days．TheproliferationratewasmeasuredbytheMTT assay