高纯脱水河豚毒素的结构表征与毒力测定研究.pdfVIP

中国海洋药物杂志 2009年 1o月第 28卷第 5期 ChinJMarDrugs，2009October，Vo1．28N0．5 高纯脱水河豚毒素的结构表征与毒力测定研究△ 谢全灵，易瑞灶 ，许晨 ，张怡评 ，陈伟珠 ，洪碧红 (国家海洋局第三海洋研 究所 ，福建 厦门 361005) 摘 要 ：目的对制备的高纯脱水河豚毒素(Anh—TTX)样品进行结构验证与毒力测定。方法 采用LC—FLD 检测法分析 Anh—TTX样品纯度 ，采用 MS和 HNMR对样品进行结构验证 ；进行高纯 Anh—TTX对小鼠的 LD5。测定。结 果 AnhTTX样品纯度为 98．3 ，样 品 MS图谱 信息与 Anh_TTX 的结构 完全相符 ，H NMR 数据 与文献报道值基 本一致 ；测得 高纯 Anh—TTX对 小鼠的 LD5o为 (1862--__46)l／g ·kg一 。结论 Anh—TTX样 品的纯度高，得到Ms和 H NMR的确证 。Anh—TTX对小鼠有较强毒性，但毒力远低于河豚毒素(TTX)。 关键词 ：脱水河豚毒素；结构表征 ；小鼠 中图分类号 ：R916．2，R994．21 文献标识码 ：A 文章编号：1002—3461(2009)05—0021—04 Structureidentificationandtoxicitydetermination ofhigh—pure anhvdr0tetr0d0t0xin XIEQuan—ling，YIRui—zao ，XU Chen，ZHANG Yi—ping，CHEN Wei—zhu，HONGBi—hong (TheThird Instituteof 0cPn0grn ^ of theStateOceanicAdministration，Xiamen 361005，China) Abstract：0bjectiveToidentifytheAnh～TTX samplewithhighpurityandstudythetoxicity ofAnh—TTX．M ethodsThepurityofAnh—TTX samplewasdeterminedbyLC—FLD andwas furtheranalyzedOilthebasisofM Sand H NM R．ThetoxicityofAnh—TTX wasevaluated accordingtoLD。onmice．ResultsThepurityofAnh—TTX samplereachedto98．3A0．The massspectrum ofsamplewasinvery wellagreementwiththestructureofAnh一，rTX．The H NMR datawassimilartotheliterature．LD50ofAnh—TTX onmicewas (1862±6) g · kg ．Conclusion TheobtainedAnh—TTX samplewasverypure，which wasproved by MS and H NMR analyses．Anh—TTX hadastrongtoxicitytomice，butitstoxicitywasfarlow— erthan TTX． Keywords：anhydr0tetrodotoxin；structureidentification；mice 迄今为止，自然界 中已发现二十几种与 所以可广泛应用于神经生物学、生理学及其 河豚毒素 (Tetrodotoxin，TTX)结构相近 的 他科学研 究 一，是 一种具有广 阔药用前景 衍生物l1]，TTX与一些常见 TTX衍生物 的 的化合物 。 化学结构如图 1所示[2]。其 中，TTX化学结 由于 Anh—TTX在生物体 内含量极小 ， 构的4位和 9位可脱去一个 H：O分子 ，形成 约为百万分分之一至千万分之一 ；而且 Anh— 脱水河豚毒素 (Anhydrotetrodotoxin，Anh— TTx与其共有组分在分子结构 、分子量及理 TTX)。Anh—TTX是生物细胞 Na一通道 阻 化性质上都非常接近 ，因此获取 Anh—TTX 断剂 ，其生理作用是可快速 阻断 Na 通道 ， 纯品非