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第 23 卷第 4 期 扬州大学学报 农业与生命科学版 V o l. 23 N o. 4
Journal of Yangzhou U niversity (A gricultural and L ife Sciences Edition)
2002 年 12 月 D ec. 2002
耐药淋球菌差异D NA 消减文库的构建
1 1 1 1 2
季明春 , 陈红菊 , 严 华 , 申厚凤 , P illay D
( 1. 扬州大学 医学院 基础医学部, 江苏 扬州 225001; 2. 大学 微生物系, 南非 德班 4000)
D urban W estvill
摘 要: 为克隆和研究淋球菌耐药相关基因, 分别从耐药性淋球菌菌株 292 4 和 标准参考淋球菌株
R SM C W HO W HO A
细胞中提取DNA , 用R sa 酶切成 400～ 600 bp 的片段。将酶切耐药菌株基因DNA 片段分别与不同的接头连接, 再与
标准参考菌株DNA 进行消减杂交及抑制性 PCR 检测, 将所得 PCR 产物与克隆载体连接, 构建差异DNA 消减文库, 并
转染大肠杆菌进行文库扩增, 获得 2 500 个克隆。随机挑取 96 个制备质粒进行 PCR 检测, 均扩增出 100～ 600 bp 大小的
片段。耐药淋球菌差异DNA 消减文库的构建为进一步筛选、克隆耐药淋球菌特异的未知新基因奠定了基础。
关键词: 奈瑟氏淋球菌; 抑制性消减杂交; 耐药; 文库
中图分类号: Q 785; R 378. 1+ 6 文献标识码: A 文章编号: 1671 4652 (2002) 04 0008 04
CONSTRUCT ION OF A D NA SUBTRACT IVE L IBRARY OF
ANT IM ICROB IAL RESISTANCE NE ISSER IA GONORRHOEAE
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J IM ing chun CHEN Hong ju YAN Hua SHEN Ho
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