食管鳞癌EC-9706 细胞中mTOR 信号通路在TGF-β1 介导的EMT 中的作用.pdfVIP

肿 瘤 2013 年 2 月 第 33 卷 第 2 期 TUMOR Vol. 33, February 2013 119 DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2013.02.003 Copyright? 2013 by TUMOR 基础研究?Basic Research β 食管鳞癌EC-9706细胞中mTOR信号通路在TGF- 1介导的EMT中的作用 1 2 1 1 1 王 峰 , 轩 小 燕 , 彭 方 慧 , 王 留 兴 , 樊 青 霞 1. 郑 州 大 学 第 一 附 属 医 院 肿 瘤 科, 河 南 郑 州 450052;2. 郑 州 大 学 基 础 医 学 院 微 生 物 学 与 免 疫 学 教 研 室, 河 南 郑 州 450001 [ 摘 要 ] 目 的:探讨食管鳞癌 EC-9706 细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)信号通路活化在转化生长因子 β1(transforming growth factor beta 1,TGF- β1)介导的上皮 - 间质转化 (epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用。方法:TGF- β1(终质量浓度为 7.5 ng/mL)或 TGF- β1(终 质量浓度为 7.5 ng/mL)+雷帕霉素(终浓度为 200 nmol/L)作用食管鳞癌 EC-9706 细胞后,在倒置显微镜下观 察细胞形态的变化,RT-PCR 及蛋白质印迹法检测 EC-9706 细胞中 mTOR 和 E-cadherin mRNA 及其蛋白的表达, 通过 Boyden 小室实验检测 EC-9706 细胞侵袭能力的变化。构建裸鼠食管鳞癌 EC-9706 细胞移植瘤模型,RT- PCR及蛋白质免疫印迹法检测雷帕霉素作用后,移植瘤组织中 mTOR和 E-cadherin mRNA及其蛋白的表达。 结果: TGF- β1 作用后,EC-9706 细胞梭形化明显,mTOR mRNA 及 p-mTOR 蛋白的表达水平高于未进行任何处理的 EC-9706 细胞对照组(P 0.05),E-cadherin mRNA 及其蛋白的表达水平低于对照组(P 0.05),细胞侵袭能 力明显高于对照组(P 0.05);TGF- β1 +雷帕霉素组 EC-9706 细胞 mTOR mRNA 及 p-mTOR 蛋白的表达水 平低于 TGF- β1单药作用组(P 0.05), E-cadherin mRNA及其蛋白的表达水平高于 TGF- β1单药作用组(P 0.05), 细胞侵袭能力较 TGF- β1 单药作用组明显下降(P 0.05)。雷帕霉素作用后,裸鼠食管鳞癌 EC-9706 细胞移植 瘤组织中 mTOR mRNA 及 p-mTOR 蛋白的表达水平低于对照组(P 0.05),E-cadherin mRNA 及其蛋白的表 β 达水平高于对照组(P 0.05)。结论:食管鳞癌 EC-9706 细胞中 mTOR 可能参与 TGF- 1 介导的 EMT 的发生, mTOR 可能作为食管鳞癌基因治疗中的有效靶点发挥作用。 [ 关键词 ] 食 管 肿 瘤; 转 化 生 长 因 子 β; 信 号 转 导; 雷 帕 霉 素 靶 蛋 白; 上 皮 间 质 转 化 [中图分类号] R735.1 [文献标志码] A [文章编号] 1000-7431 2013 02-0119-07 β The effect of mTOR signalling pathway on epithelial-mesenchymal transition mediated by TGF- 1 in esophageal squamous cell carcinoma EC-9706 cells 1 2 1 1 1 WANG Feng , XUAN Xiao-yan , PENG Fang-hui ,W A N GL i u - x i n g ,F A NQ i n g - x i a1 D e p a r t m e n to fO n c o l o g y ,F i r s tA f fi l i a t e dH o s p i t a lo fZ h e n g z h o uU n i v e r s i t y ,Z h e n g z h o u4 5 0 0 5 2 ,H e n a nP r o v i n c e ,China; 2Department of Microbiology and Immunology, Basic Medical College