免疫胶体金技术及其在肉类安全检测中的应用.pdfVIP

．：．质量 ·卫生 ·标准 ·安全．：． 、旬囊·鼻业 2010年第8期 MEAT INDUSTRY 总第352期 免疫胶体金技术及其在 肉类安全检测 中的应用 邹程焓 西南大学食品科学学院 重庆北碚 400716 摘 要 免疫胶体金技术是一种新的免疫学方法，在各领域得到 了日益广泛的应用。主要介绍了免疫胶体金 技术的原理 ，特点以及在肉类安全检测中的应用。 关键词 免疫胶体金技术 特点 应用 hnnlw[iecolloidalgold techniqueanditsapplicationinmeatsafetyinspection Abstract Immunecolloidalgoldtechniqueisanewkindofimmunologicalmethod，whichhasbeen widelyusedin variousfields．In thispaper，theprinciplesand characteristicsofimmunecolloidalgold techniqueaswellasitsapplicationinmeatsafetyinspectionweresummarized． Keywords immunecolloidalgoldtechnique；characteristics；application 胶体金，是金的一种存在状态，是指氯金酸 40nm大小。在胶体金与蛋 白质偶联的过程 中金颗 (HAuCI)在还原剂作用下，可聚合成一定大小的金 粒的品质起着决定性的作用，如果应用劣质的胶体 颗粒，形成带负电的疏水胶溶液 ]。免疫胶体金技 金用于标记直接影响试纸条的灵敏度 ，稳定性和特 术是以胶体金为标记物，利用特异性抗原抗体反应， 异性，因此在标记前可应用透射电镜 (TEM)对胶体 在光镜电镜下对抗原或抗体物质进行定位 、定性乃 金颗粒的结构进行评价 ，也可 以通过颜色来判断金 至定量研究 的标记技术 。 溶液的质量，我们常用的20～40nm的金颗粒呈深红 色 ，吸收波长为530nm。 1 免疫胶体金技术的原理 2．2 蛋白的标记 胶体金标记，实质上是蛋 白质等高分子被吸附 根据检测 目的的不同来选择标记抗原还是抗 到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附的原理 ：(1) 体。细胞裂解液、纯化蛋 白或重组蛋 白都可以作为 金粒子所带的负电荷与蛋 白内的氨基酸(如赖氨酸) 相关抗原的来源，而对于某些小分子物质像激素、药 物及其他小分子(10KD)与金表面没有足够的结 所带的阳性电荷 的最初 的相互吸引；(2)蛋白通过某 些氨基酸残基包括色氨酸与金粒子表面之间的疏水 合位点，在被动交联之前必须先结合到大分子载体 上 ，多为牛血清蛋 白。在以检测抗原为 目的的试纸 吸附作用；(3)蛋 白中的半胱氨酸的硫基与金粒子间 条制作时，则选用抗体作为被标记物，单克隆抗体和 的配价结合。 多克隆抗体都可以做为标记用抗体。单克隆抗体成 2 免疫胶体金的制备 分单一，特异性好而多用于标记 ，但应注意的是在选 用单克隆抗体配对时针对同一抗原的两种单克隆抗 2．1 胶体金的制备及质量鉴定 体的抗原决定簇应不