二硫苏糖醇直接光度法测定钴离子含量.pdfVIP

广东微量元素科学第 卷第 期 文章编号:?一 ?二硫苏糖醇直接光度法测定钴离子含量 诸葛蔚山 陈桠雯 金秀儿 连国军.温州 医学院第二临床学院,浙江 温州 ; .温州医学院环境与公共卫生学院,浙江 温州 摘 要:为建立简便、灵敏测定钴离子含量的方法,在表面活性剂存在下,用二硫苏糖醇 丫 为显色剂测定钴离子。结果表明,该法线性范围 ~ . ,平均回收率为 . %,批内变 异系数 和批间变异系数分别为 . 、 . ,与原子吸收法比较具有良好的相关性,线性回 归方程和相关系数分别为.. ,. 。用该法测定钴离子,方法简便、 灵敏可靠,适合实际推广应用。 关键词:钴;二硫苏糖醇;直接光度法 中图分类号:. 文献标识码: 钴是人体必需的微量元素,与人体健康有着密切关系。年? 等 发现心肌缺血 发作时,人血清白蛋白 一末端将发生改变,其与钴的结合能力也发生相应改变,目前文献法常 采用钴结合试验 试验 对Ⅳ一末端受损的白蛋白 也称缺血修饰白蛋白,简称进行定 量。已经有多篇文献报道了微量钴的测定方法 ,但这些方法均在强酸性条件下对钻进行测 定以达到较好的选择性,并不适合白蛋白钴结合试验中钴的定量分析。本文以表面活性剂为增稳 剂、二硫苏糖醇为显色剂建立了近中性条件下快速测定微量钴的新方法,方法选择性好、自动化 程度高,不仅适用于 的常规分析,而且可为试验法定量检测 打下基础,报道如 下 原 理 在. 的磷酸盐缓冲液中,钴离子与发生灵敏的显色反应,用全自动生化分析仪 比色定量。 材料和方法 . 仪 器一 型紫外分光光度计 日本岛津 、日立 型全自动生化分析仪、 一 型酸度 计 上海雷磁分析仪器厂 。 . 试 剂 . . 钴校准品 精密称取硫酸钴 上海国药集团化学试剂有限公司 . ,用去离子水 溶解并准确定容至 ,得到 浓度为. 的钴校准品。 收稿日期: ? ? 基金项目:温州医学院学生科研课题 通讯作者:连国军。 . . 广东微量元素科学第 卷第 期 . . 试剂 含. ?缓冲液 苏州亚科化学试剂股份有限公司 、 聚氧乙烯类表面活性剂 上海国药集团化学试剂有限公司 . / 、叠氮钠 上海西宝生物科 技有限公司 . / 、掩蔽剂适量。 . . 试剂Ⅱ 含 丌 夏门市裕泰康进出口有限公司 . / 、聚氧乙烯类表面活性剂 上海 国药集团化学试剂有限公司 . / 、叠氮钠 上海西宝生物科技有限公司 . / 。 . 方 法 . . 自动分析法仪器参数 以日立 型全自动生化分析仪为例,标准液浓度 . ; 两点终点法; ℃;主波长 ,次波长 ;样品量;试剂 量 ,试剂Ⅱ 量 ;测定时问:加试剂 上海西宝生物科技有限公司 后,测吸光度 ,再加人试 剂Ⅱ后,测吸光度 。 . . 计 算 一 测定管/一 标准管 .式中, 的单位为/结果与讨论 . 吸收光谱 以试剂空白为参比,测得标准管、测定管两者络合物最大吸收波长均在 处 图 , 由于全自动生化分析仪无 波长,选用靠近 的 为自动分析法的测定主波长。 . 反应终点时间及显色稳定性 “ 按本法操作,加入试剂Ⅱ后高达 . 的 可在 内与显色完全 图 并至少稳定 。 图 加入试剂Ⅱ后反应曲线 . 标准曲线 取一定量的 标准液,倍比稀释后用于本法的线性测定。试验结果表明,本法的线性范 围可达 . / ,回归方程和相关系数分别为 测定值. 一 . ,. 。 . 回收试验 取已测得 “含量为 .的模拟水样中分别加入 . 、 . 、 . 的“标准品进行回收试验,回收率分别为 . %、 . %、 . %,平均回收率为 . %。 广东微量元素科学第 卷第 期 . 精密度 将一份模拟水样分为 份,按本法测定,测得 平均值为 .,批内变异系数 .。另取一份模拟水样连续测定,每天平行两次,测得 “平均值为./ ,批间为 .。 . 方法对比试验 用原子吸收法 和本法分别测定 例模拟水样,原子吸收法 测得的平均值为 ./ ,本法测得的平均值为 . / ,回归方程为. . , : .,经 检验,两者差异无显著意义 .。 . 干扰试验 在本法测定条件下,胆红素质量浓度少于 / 、血红蛋白质量浓度少于/ 、甘油 三酯浓度少于 . 、浓度少于/ 、 ”浓度少于 // 、 “浓度 少于 // 、 浓度少于 ./ 、浓度少于 . / 不干扰,血清中其它常 量和微量元素 倍量不干扰。 . 讨 论 缺血修饰白蛋白 作为一个能早期反映心肌缺血的灵敏指标近年来备受关注,目 前其检测方法多为白蛋白钴结合 试验。在白蛋白钴结合试验中,需要在生理条件下对钴 进行准确定量以推算出 的含量。文献报道的钴测定方法均选择在强酸性条