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第 27 卷 第 2 期 分析测试学报 Vol27 No2
2008年 2 月 FENX I CESH I XU EBAO (Jou rnal of In strum ental Analysis) 127～130
绿色荧光蛋白为传能对的供体光漂白法
测定 FR ET效率的探讨
1 2 1, 2 2
周晓娟 , 郭慧芳 , 刘德龙 , 孙大业
( 1. 河北师范大学 化学学院 , 河北 石家庄 050016; 2. 河北师范大学
生命科学学院 , 河北 石家庄 050016)
( )
摘 要 : 探讨以两种新荧光蛋白M iCy, m Ko为传能对并应用供体光漂白法测量荧光共振能量转移 FRET 效
率 。首先通过基因工程方法表达纯化了这两种蛋白, 并测量了荧光光谱及光漂 白性质 , 表明 M iCy极易光漂
白而 m Ko抗光漂白。进一步以 N i - N TA - agaro se 为 FRET模型 , 在 Confocal上对 M iCy进行光漂 白时间常数
的测量 , 并计算了 FRET效率 。结果表明 M iCy - m Ko传能对适合用供体光漂白法测量 FRET效率 , 此传能对
将在蛋白质相互作用研究中有广泛应用 。
关键词 : 绿色荧光蛋白; 荧光共振能量转移 ; FRET效率 ; 光漂白
中图分类号 : O65763; S482 33 文献标识码 : A 文章编号 : 1004 - 4957 (2008) 02 - 0 127 - 04
D eterm ination of FR ET Efficiency U sing Donor Photob leach ing M ethod
w ith Green F luore scent Protein s a s Energy Tran sfer Pair
1 2 1, 2 2
ZHOU X iaojuan , GUO Hu ifang , L IU D elong , SUN D aye
( 1. College of Chem istry, H ebei Norm al U n iversity, Sh ij iazhuang 0500 16, Ch ina;
2. College of L ife Science, H ebei Norm al U n iversity, Sh ij iazhuang 0500 16, Ch ina)
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