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Rainin 产品在qPCR 中的应用
实时荧光定量PCR （RT-PCR）应用范围：
现已普遍应用于临床及生命科学研究的各个领域中。在科研方面可定量分析各种基因的表达分析，基因突
变和多态性分析，单核苷酸多态SNP 测定及易位基因的检测；在医疗方面可用于免疫组化分析、临床疾
q 病早期诊断、病原体检测、耐药性分析、肿瘤微小残留病变研究等。
据不完全统计相关国家标准强制要用QPCR 仪进行检测：
《GB/T 194380.1-2004 禽流感病毒通用荧光RT-PCR 检测方法》
P 《SN/T 1632.3-2005 奶粉中阪崎肠杆菌检验方法：荧光PCR 方法》
《SN/T 1870-2007 食品中致病菌检测方法：实时PCR 法》
《GBT 21105-2007 动物源性饲料中狗源性成分定性检测方法PCR 方方法》
C 《GBT 21102-2007 动物源性饲料中兔源性成分定性检测方法实时荧光PCR 方法》
《GBT 19915.8-2005 猪链球菌2 型毒力因子荧光PCR 检测方法》
《GBT 19495.4-2004 转基因产品检测核酸定性PCR 检测方法》
《SNT 1686-2005 新城疫病毒中强毒株检测方法荧光RT-PCR 法》
R 《SN 0169-1992 出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法》
qPCR 实验的特点
1. 在进行相对定量分析的时候，如果每次参照物模板的加入量和样品加入量产生巨大差异，会导致分析
时的基因表达比差异。
2. 在无法使用内参的时候，基因表达的差异就会归结到所有加入的RNA 数量上，因此，加入准确的
RNA 数量会直接影响到内参基因的选择。
3. 在完成大量PCR 加样时，如96 孔板，过长的加样过程会导致样品的蒸发，从而影响后期实验。
4. QPCR 对于每次反应的模板数量极为灵敏，细小的定量差别也会导致后期数据分析中产生巨大偏差，
从而导致实验失败
总而言之移液的准确性精确度对qPCR 十分重要！
qPCR 实验常见的问题一：
重现性不好：
q 可能的原因：
移液操作失误
样品挥发
P
Rainin 解决方案：
C 熟悉实验方案，加样方案烂熟于心
根据加样习惯，使用电动单道或者多道移液器
电动移液器的优势：1. 使用连续分配功能，吸液一次即可连续分液多次，提高效率，避免
R 试剂在室温下由于暴露时间过长而挥发。
2 ．使用连续分配功能，屏幕可显示已分配次数，即便实验过程有人
打扰，也不会多加或者漏加。
3．电动步进马达控制加液量，一旦设定好后，不受操作手法影响，
保证每次加样的一致性。
4 ．避免频繁吸/排液需要的拇指用力，缓解手部疲劳。
Rainin 多道移液器优势：1. LTS 圆柱形套柄，不需敲或者左右摇晃即可上紧吸头，且上紧
吸头的瞬间使用者能明显感
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