代谢酶的乙酰化蛋白组学和鸟氨酸氨甲酰转移酶的乙酰化调控的研究.pdf

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指导小组成员 管坤良教授 熊 跃教授 赵世民副教授 雷群英副教授 目录 缩略词………………………………………………… 摘要………。 ABSTRACT……………。。 。5 第一章前言……………。。………。 一.研究背景…………………………………………………………………………..7 1.1蛋白质的翻译后修饰…………………………………………………………………7 1.2组蛋白的乙酰化…………………………………………………………………….9 1.3非组蛋白的乙酰化研究……………………………………………………….14 1.4,J、结.……………..………..……….………….…….………………….…..………….…………….:17 二本文主要的研究内容、目的、意义及创新点…………………………………..28 三参考文献……………………………………………………………………………..30 第二章代谢酶的乙酰化蛋白质组学的研究… ….3/ 2.1研究背景…………………………………………………………………………37 2.2材料和方法………………………………………………………………………38 2.2.1组织样品…………………………………………………………………….38 2.2.2实验步骤……………………………………………………………………38 2.3试剂………………………………………………………………………………………………………。42 2.3.1生化试剂……………………………………………………………………42 2.3.2免疫学相关试剂…………………………………………………………….44 2.4仪器设备………………………………………………………………………….44 2.5结果……………………………………………………………………………………………………….45 2.5.1自制乙酰化赖氨酸多抗的鉴定………………………………………………45 2.5.2质谱鉴定的乙酰化蛋白质和肽段的比较…………………………………46 2.5.3质谱鉴定的乙酰化蛋白质的生物信息学分析……………………………48 2.5.4乙酰化修饰蛋白质和主要代谢通路的关系……………………………….48 2.6讨论……………………………………………………………………………………………………….!;3 2.7结论……………………………………………………………………………………………………….57 2.8参考文献…………………………………………………………………………….58 第三章鸟氨酸氨甲酰转移酶(OTC)的乙酰化调控的研究… 3.1研究背景…………………………………………………………………………73 3.2材料和方法…………………………………………………………………………75 3.2.1实验步骤………………………………………………………………………………75 3.2.2试剂和培养基配置…………………………………………………………………8l 3.2.3仪器设备………………………………….…………………………………………83 3.3结果……………………………………………………………………………………………………….83 3.3.1OTC的K88位是被乙酰化修饰的…………………………………………….83 3.3.2去乙酰基转移酶抑制剂降低了OTC的活性………………………………86 3.3.3 OTC的K88的乙酰化修饰抑制了OTC活性…………………………….87 复旦大学博士毕业论文 3.3.4 K88乙酰化修饰受到葡萄糖和氨基酸浓度的调控………………………90 3.3.5 SIRT3和OTC在体内相互作用……………………………………………92 3.3.6 SIRT3是OTC的去乙酰基转移酶………………………………………一93 3.3.7 SIF汀3蛋白水平的降低提高了OTC的乙酰化水平…………………….94 3.4讨论……………………………………………………………………………………………………….95 3.5结论………………………

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