hpt与bar基因作为水稻转基因筛选标记的比较研究.pdfVIP

逢 HEREDITAS(Beijing)2012年12月 ISSN0253-9772 WWW．chinagene．CI3 研究报告 DoI：10．3724／SP_J．1005．2012．01599 hpt与bar基因作为水稻转基因筛选标记的比较研究 张春雨 ，李宏宇 ，刘斌 1．沈阳农业大学农学院，沈阳 110161； 2．中国农业科学院作物科学研究所，北京 100081 摘要：标记基因的选择是影响植物遗传转化和转基因后代筛选成败的关键因素。pf与bar作为两种常用的水 稻转化筛选标记被广泛应用于水稻的转化。为比较两者在实际应用中的效果，文章首先对 比了在潮霉素和除草 剂(Bialaphos)~种筛选剂下水稻遗传转化的情况。研究表 明， ，基因的转化筛选体系相对于bar基因在转化效 率上提高近两倍，转化周期提前至少 10d，且插入基因拷贝数更低。随后，文章分析了利用潮霉素浸种法在 田 间筛选转基因水稻的可行性，研究显示当潮霉素浓度大于 167mg／L时，可以对以水稻品种 kitaake为亲本的转 基因材料进行有效筛选，达到常规除草剂的筛选效果。但与除草剂相比较，潮霉素的田间筛选成本却处于劣势。 文章研究和讨论了 ，和bar基因在遗传转化和后代 田间筛选 中的优缺点，并提供了一种利用潮霉素浸种法筛 选转基因后代阳性植株的手段，为将来在水稻转基因研究工作中根据实际需求选择合适的遗传转化、筛选体系 提供参考 。 关键词：hpt基因；bar基因；转基因筛选；潮霉素浸种；水稻 A comparison study ofhptand bar asselection marker gene of transgenicrice ZHANG Chun．Yu ．LIHong—Y ．LIU Bin 1．CollegeofAgriculture，ShenyangAgricultureUniversity，Shenyang110161，China； 2．InstituteofCropScience，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Beoing100081，China Abstract： Thedecisionofusingselectionmarkerisoneofthekeyfactorsforsuccessofplantgenetictransformation andoffspring screening．Astwocommonlyused selectionmarkers，hptandbargenesarewidelyused in tissuecul- ture—basedricetransformation．Toexperimentallycomparetheirperfomr ance，weinvestigatedtheefficiencyofwt ortans— fomr ationsystemsusingHygromycinandBialaphosastheselectionagents，respectively．Theresultindicatedthatthesys— tem usinghptgeneastheselectionmarkersaved 10daysandhaddoubletrnasfomr ationefficiencyandlowerrtansgene copynumberincomparisontothesystem usingbargene．Then，weassessedthefeasibilityofscreeningtransgenicricein thefieldbysoakingthewild—typeandtransgenicseedsinaseriesofsolutionscontainingstepdilutedhygromycinfortwo days．Wetargetedhtesuitableconcenrtationfordistinguishingthetransgenicseedsfrom WTKitaakeseedswas167mgL～． 收稿 日期：2012—02—29；修 回日期：2012—04—23 基金项 目：国家转基因生物新品种培育重大专项(编号：2010ZX08010-002)资助 作者简介：张春雨，硕士，研究方 向：水稻超高产育种，Tel：010E—mail：nzcy@163．tom 通讯作者：刘斌，博士，副研究员，研究方