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浙江农业学报ActaAgriculturaeZhejiangensis,2012,24(6):961-968 http://www.zjnyxb.cn
宋雪梅,姜俊芳,蒋永清.MutationSurveyor在插~k/缺失杂合子突变分析中的应用[J].浙江农业学报,2012,24(6):961
— 968.
MutationSurveyor在插入/缺失杂合子突变分析中的应用
宋雪梅,姜俊芳,蒋永清
(浙江省农业科学院 畜牧兽医研究所,浙江 杭州 310021)
摘 要:结合实例简述了MutationSurveyor软件在碱基替换和插入/缺失突变,尤其是插入/缺失杂合子突变
研究中的应用。以浙江省余杭湖羊场和屠宰场 144头湖羊为试验材料,采用 PCR—SSCP和测序的方法检测干
扰素刺激基因(ISG15)基因5侧翼区序列,并利用MutationSurveyor软件分析其遗传多态性。PCR—SSCP检测
结果显示ISG15基因5侧翼区PCR-SSCP带型非常复杂 ,无法直接判定个体的基因型。利用MutationSurvey—
or软件分析发现湖羊ISG15基因5侧翼区存在 152C/T,158dupC和239C/T3种突变。其中152C/TC等
位基因频率为0.83,为低度多态的分子标记;158dupC等位基因频率为0.5125,239C/TC等位基因频率为
0.7675,均为中度多态的分子标记。除239C/T外,152C/T和 158dupC均处于 Hardy—Weinberg平衡状态 (P
0.05)。试验结果显示MutationSurveyor软件在分析插入/缺失杂合子突变的测序结果时有较大优势,可用
于碱基替换和插入/缺失SNPs的通量筛选和分析。
关键词:MutationSurveyor;InDel;ISG15;湖羊
中图分类号:S823.2 文献标志码:A 文章编号:1004—1524(2012)06-0961—08
Application ofM utation SurveyorinanalyzingheterozygousInDel
SONGXue—mei,JIANGJun·fang,JIANGYong-qing
(InstituteofAnimalHusbandryandVeterinary,ZhefiangAcademyofAgricuhralScicences,Hangzhou30021,China)
Abstract:ThepresentstudyaimedtoshowtheapplicationofMutationSurveyorinanalyzingnucleotidesubstitutions
andInDelwithna instance.ThepolymorphismsinISG155 flankingsequenceswereanalyzedfor144Husheepfrom
YuhangHusheepfarm and slaughterhouse bypolymerasechainreaction—singlestrandconformationpolymorphism
(PCR—SSCP)technique,DNAsequencingandMutationSurveyorsoftware.PCR—SSCPanalysisshowed1SG155
flankingsequencesbandsweretoocomplextodeterminegenotypedirectly.TheanalysisresultofMutationSurveyor
foundtherewerethreepolymorphisms,152C/T,158dupC and239C/T,inISG155 flankingregion.Therfequen-
cyofalleleCinloci152was0.83showinglowpolymorphism (PIC =0.2424).TherfequencyofalleledupCinlo—
ci158was0.5125showingmediatepolymorphism (PIC = 0.3748).T
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