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烤烟叶片发育过程中类胡萝卜素代谢的初步研究
韦凤杰
(河南农业大学农学院 国家烟草栽培生理生化研究基地,河南 郑州
450002)
摘 要 利用反相高效液相色谱法和分光光度计法初步对不同部位烤烟叶
片发育过程中类胡萝卜素进行了测定。结果表明,烤烟发育过程中类胡萝卜素含
量随生育时期的推进而逐渐下降,但不同部位叶片的类胡萝卜素代谢有明显差
异。烤烟发育过程中中部叶片的β胡萝卜素、新黄质、紫黄质、叶黄质、叶黄
素均在欠熟期有一低谷,且定长-欠熟-尚熟阶段变化呈明显“V”型。与下部
叶片、中部叶片相比,上部叶片发育后期β胡萝卜素、新黄质、紫黄质、叶黄
质、叶黄素含量均较高,其中β胡萝卜素含量最高,为68.04μg/g。
关键词 烤烟 叶片 发育 类胡萝卜素 代谢
类胡萝卜素是存在于植物和微生物中的脂溶性色素,通常是指C40的碳氢化
合物(胡萝卜素)和它们的氧化衍生物(叶黄素)两大类色素的总称[1,2]。类胡
萝卜素在植物叶绿体光合作用中起着重要作用,它们是光合作用中光传导途径和
光反应中心的重要结构成分,担当叶绿体光和天线的辅助色素,帮助叶绿体吸收
光能;另一方面,它们在高温、强光下能通过叶黄素循环,以非辐射的方式耗散
光系统II(PSII)的过剩能量保护叶绿素免受破坏[3,4,5]。类胡萝卜素也是合成植物
[6]
激素ABA的前体 。在烟叶中,类胡萝卜素作为许多重要致香成分的前提物对烟
草香味品质的形成有重要作用[7,8]。烟草品质形成是烟草在品种、生态环境等综
合条件下发育的结果。研究烟草发育过程中的类胡萝卜素代谢具有重要意义。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验以烤烟K326为供试品种,设盆栽试验。地点设在河南农业大学科教示
范园区国家烟草栽培生理生化基地试验网室内。
试验用素烧陶盆,高40cm,盆口直径40cm,盆底直径35cm,试验前,先在
网室内起垄,按100cm×45cm,行、株距,将陶盆置于垄上。纯施化肥,每盆施
纯N2.5g,KNO 13.89g,NHH PO 3.47g,过磷酸钙21.27g,K SO 1.05g;各处理
3 4 2 4 2 4
+ -
NH -N与NO -N按1:3,N、PO 、K O等量,且N:P O :KO=1:2:2.5,每盆施纯
4 3 2 5 2 2 5 2
N2.5g。每盆装土20kg,装盆前土经过风干,并过0.5mm×1mm网筛。
供试土壤情况:pH=7.8,有效氮5.05mg/100g,有效磷10.1mg/1000g,速
效钾105mg/1000g。按试验设计,将土壤与肥料混合均匀后装盆。装盆时每盆埋
插塑料管供浇水用。5月17日移栽烟苗,移栽后定量浇水,保持每盆含水量基
本一致。田间管理如常规。
1.2 测定项目与方法
对烤烟分上、中、下三部分取叶(从下往上数分别为第3-5片、第11或
12片、第16-18片叶)于1/2定长、定长、欠熟、尚熟、成熟、完熟分六次取
样,每处理重复三次。
[9]
总类胡萝卜素按采用比色法 法进行。计量单位:mg/g。
β-胡萝卜素、新黄质、紫黄质、叶黄质测定方法为反相高效液相色谱法。
工作条件为:液相色谱仪系统包括Waters515泵,Waters2487紫外可见光分光
光度检测器,Empower色谱工作站,Rheodyne7725i型手动进样阀。试剂:甲醇
为Sigma公司生产的色谱纯试剂,异丙醇为 J.T.Baker 公司生产的色谱纯试剂;
叶黄质、紫黄质、新黄质植物色素标准物由日本WAKO公司生产,β-类胡萝卜
素、β-阿朴-8-胡萝卜醛、BHT等购于Sigma公司。样品前处理:取新鲜烟
叶,擦净组织表面污物,剪碎(去掉中脉),混匀;称取剪碎的新鲜烟叶样品
5g,放入研钵中,加少量石英砂和5ml 90%丙酮(内含0.
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