绵羊甘露聚糖结合凝集素基因（MBL）全长DNA序列克隆及生物信息学分析.pdfVIP

戋毒 Onlinesystem：http：／w／ww．jabiotech．org 黢照熊秘獭撩 农 业 生 物 技 术 学 报 豳瑟■黼-■I_ JournalofAgriculturalBiotechnology 2012，20(12)：1414～1423 DOI：10．3969~．issn．1674-7968．2012．12．008 研究报告 Letter 绵羊甘露聚糖结合凝集素基因 B)全长DNA序列克隆及生物信息学 分析 赵宗胜 赵凤 张红梅 贾斌 余鹏 张慧 班谦 王建梅 王小义 1石河子大学动物科技学院，石河子 832003；2石河子大学医学院第一附属医院，石河子 832002；3石河子大学生命科学学院，石河子 832003 通讯作者，zhaozongsh@shzu．edu．cn 摘 要 绵羊甘露聚糖结合凝集素(MBL)是肌体天然免疫系统的重要组成部分。根据人旧。 sapiens)~rl 牛(Bostaurus)的MBL基因序列的同源保守区域，分段设计 9对特异性引物，以中国美利奴羊(Ovisaries)l~ll 液基因组DNA为模板，经扩增、测序、拼接，首次克隆到长为4462bp的绵羊MBL基因组DNA序列，包括 了该基因的启动子区、4个外显子和 3个 内含子，编码 249个氨基酸；BLAST分析其与牛MBL—C编码的氨 基酸同源性最高为96．39％，判定其为MBL—C型基因，并将该序列提交至GenBank (AccessionNo． FJ977629)：通过Expasy网站预测其蛋白结构功能特征，1～19氨基酸为绵羊MBL基因信号肽区域，外显子 1编码N．端富含胱氨酸区和8个Gly．X．Y重复序列的胶原样区，外显子2含有 12个Gly—X—Y的胶原样 区，外显子4编码的碳水化合物识别域 (CRD)具有C型凝集素CRD的共同特征。本研究为国内首次报道 绵羊MBL基因比较完整基因组DNA序列，为深入研究MBL的结构与功能以及MBL缺损的分子机制 提供基础数据。 关键词 绵羊，甘露聚糖结合凝集素(MBL)，序列分析 CloningandBioinformaticsAnalysisofM annan—bindingLectin Gene (MBL)Full—lengthDNASequenceinSheep(Ovisaries) zHA0Zong-Sheng zHAOFeng zHANGHong-Mei J Bin YuPen zHANGHui BANQian W ANGJian—M ei WANGXiao．Yi 1CollegeofAnimalScienceandTechnology，ShiheziUniversity，Shihezi832003，China；2TheFirstAffiliatedHospitalofShiheziUniversity MedicalCollege，Shihezi832002，China；3CollegeofLifeScience，ShiheziUniversity，Shihezi832003，China Correspondingauthor，zhaozongsh@shzu．edu．cn Abstract Sheepmannose。bindinglectin (MBL)isanimportantpartofthebody’Snaturalimmunesystem． Ninepairsofprimersweredesignedaccordingtohuman (Homo spiens)andbovine(Bostaurus)MBLgene sequence，combinedwithPCRtechniquetoamplifytheMBLgeneofsheep (Ovisaries)．Cloning，sequencing andsplicingtoanalyzebio