模拟微重力对大鼠PC12细胞衰老的影响.pdfVIP

第46卷 第6期 哈尔滨医科大学学报 Vo1．46，No．6 2012年 12月 JOURNALOFHARBINMEDICALUNIVERSⅡ’Y Dec．，2012 521 基础研究 模拟微重力对大鼠PC12细胞衰老的影响 赵雨娟 ，张 佳 ，王菁华 ，孙 博 ，王广友 ，么秀华 ，李 娜 ，李呼伦 ，穆莉莉 (1．长春市中心医院，吉林长春130000；2．哈尔滨医科大学神经生物学教研室， 哈尔滨医科大学神经生物省高校重点实验室，黑龙江 哈尔滨 150081) [摘要] 目的 探讨模拟微重力对 PC12细胞衰老的影响及相关机制。方法 用旋转细胞培养系统进 行模拟微重力条件下的细胞培养。选取模拟微重力和正常重力条件下培养6h，12h，24h，48h，72h和 96h的PC12细胞作为研究对象。流式细胞仪检测PC12细胞各个细胞周期分布的变化；Westernblot方 法检测PC12细胞 P53蛋白的变化 ；生化反应试剂盒检测活性氧变化；衰老相关 B半乳糖苷酶 (SA．B． ga1)特异性染色对衰老的PC12细胞进行评估。结果 细胞周期分析的结果显示 ，经过模拟微重力培养 的PC12细胞其细胞周期阻滞在 G1期。在模拟微重力培养96h细胞周期蛋白P53表达均升高。SA．B． gal染色的结果显示在模拟微重力的作用下，PC12细胞SA—B—gal的活性随着模拟微重力培养时间的延 长而逐步升高。PC12细胞内H0 的水平升高，并且具有时间依赖性。模拟微重力细胞培养上清中的 H：O：也相应升高，但是滞后于细胞内的H：O：。结论 ①模拟微重力可以引起PC12细胞 SA-B-gal的活 性升高，G1期细胞周期阻滞和P53的活化；②模拟微重力条件下诱导 PC12细胞衰老可能通过氧化应激 实现。 [关键词] 模拟微重力 ；细胞衰老；PC12细胞；氧化应激 [中图分类号]Q255；R85 [文献标识码]A [文章编号]1000—1905(2012)06—0521—05 SimulatedmicrogravityoncellularsenescenceofratPC12cells ZHAOYu-juan，ZHANGJia，WANGJing．hua，SUNBo。，WANGGuang-you，YAOXiu- hua ，LINa ，LIHu．1un ，MU Li—li (1．ChangchunCentralHospital，Changchun130000，China；2．DepartmentofNeurobiology HeilongfiangProvincialKeyLaboratoryofNeurobiology，HarbinMedicalUniversity，Harbin 150081，China) Abstract：0bjective Toinvestigatetheeffectofsimulatedmicrogravityon．cellularsenes— cenceofPC12cellsand itsmechanism．M ethods Themicrogravityenvironmentwassimula- tedbyarotarycellculturesystem．PC12cellswereculturedundersimulatedmicrogravityand normalgravityf0r6h，12h，24h，48h，72hand96h．Cellcycle(GO／G1，S，andG2／M) dis；tributionwasdetemr inedbyflow cytometry．P53proteinwasdetectedbyW estern blot．The activitiesofH，0，weredetectedbychemistryreactionKit．Senescence—associatedp-galactosi- dase(SA—B-ga1)wasemployedtodistinguishthesenescentPC12cells．Results Therewasa G1phasearrestinthecellcycleofsimulatedmicrogravityculturedPC12cells