中药中有机酸成分快速甲醋化方法的研究.pdfVIP

第35卷 分析化学 (FENXIHUAXUE) 研究简报 第5期 2007年5月 ChineseJournalofAnalyticalChemistry 719-722 中药中有机酸成分快速甲醋化方法的研究 池玉梅’‘于生 ‘许黎君，武露凌“ (南京中医药大学，南京210029) 2(江苏省体育科学研究院，南京210014) 摘 要 以中药材猫爪草为分析对象，研究了简便快速分析中药中有机酸成分的方法。方法以10%硫酸甲 醇一苯(1:1)溶液为甲醋化试剂，利用微波辅助直接甲醋化药材，在微波功率600W、压力0.2MPa的条件下， 反应Imin即完成对药材中有机酸的甲醋化;采用气相色谱一质谱(GC-MS)联用技术进行分析，检出有23个色 谱峰;经NIST7000标准谱库检索，识别了18种有机酸(占总峰面积的%.79%)，并用对照品进行了验证。对 不同来源的猫爪草药材进行分析，检出有20个共有峰，经方法学验证，符合指纹图谱的检测要求。 关键词 微波，气相色谱一质谱联用，甲醋化，有机酸，猫爪草，指纹图谱 1 引 言 有机酸广泛存在于植物的各种部位。研究发现，许多有机酸都具有生理活性1,「2]。用于此类化合 物含量测定的方法有气相色谱’〕〔、反相高效液相色谱[4]、离子色谱’〕〔及毛细管电泳[〕“等。而中药中有 机酸成分的研究分析则大多采用GC-MS171。柱前衍生化方法有三氟化硼法、酸催化或碱催化醋化法 等，这些方法反应时间长、操作繁琐。本研究采用了硫酸催化甲酷化，利用微波加热物品渗透力强的特 性，首次对采用微波辅助直接甲醋化中药材中有机酸的方法进行了研究，并改进了后处理方法，使反应、 萃取过程成为一体，大大简化了操作过程。 中药材猫爪草(RadixranunculiTernati.)为毛莫科植物小毛莫(RanunculusternatusThunb.)的块根， 性甘、辛，微温，具有清热解毒、消肿散结之功效[8]。文献报道小毛莫内醋为其抗结核成分’〔〕，十六烷酸 为抗肿瘤成分 「]“‘。但有关药材中有机酸成分的分析及分析方法的研究至今未见报道。本研究采用微 波辅助直接甲醋化中药材猫爪草中有机酸成分，结合气相色谱一质谱联用技术，通过与未甲醋化药材及 对照品比对的方法，分析了其中的有机酸成分，并通过检测不同来源的药材，研究了药材中共有的有机 酸成分，首次对猫爪草中的有机酸成分及有机酸成分的指纹图谱进行了较全面的研究分析。 2 实验部分 2.1仪器与试剂 GC6890-MS型气相色谱一质谱联用仪(美国Agilent公司)，配HP7683全自动进样器、NIS12000标 准谱库;MDS-6型微波消解炉(上海新仪微波化学科技有限公司)。草酸、丁二酸 、柠檬酸、棕搁酸、油 酸、硬脂酸、浓硫酸、苯及氯化钠均为分析纯，甲醇为色谱纯。药材购于河南信阳、安徽毫州及南京等地。 取草酸、丁二酸、柠檬酸、棕搁酸、油酸、硬脂酸各0.1g，准确称定，分别置于5.0mL容量瓶中，加甲 醇溶解并定容，摇匀。准确吸取上述各溶液1.0mL于同一25mL容量瓶中，定容，得混合有机酸对照品 贮备液(I)。在冰水浴中，将10mL浓H2S04缓慢倒人90mLCH30H中，搅匀，待冷却后加人100mL 苯，摇匀即得甲醋化试剂。 2.2 微波条件 微波功率600W，压力0.2MPA，辐射1mina 2.3 GC-MS分析条件 质谱条件:El离子源;电子能量70eV;离子源温度230℃;四级杆温度150℃;检测电压1482V;溶 2006-08-22收稿;2006-12-05接受 本文系国家自然科学基金资助项目(No *E-mail;ymchi@ 分析化 学 第35卷 剂延迟5min, 色谱条件:HP-INNOVAX色谱柱(30mx320Nmx0.5li,m);氦气(99.999%)为载气，流速 1.5mUmin;柱前压0.171MPa;进样口温度220OC;分流进样(分流比10:1);程序升温:初始温度60`C 三暨纸200℃(1min)。 2.4 供试品溶液制备 准确称取药材粉末(0.24mm粒径)0