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牡丹江医学院学报 2004 年 第 25 卷 第 4 期
·14 · JOURNAL OF MUDANJ IAN G MEDICAL COLL EGE Vol. 25 NO. 4 2004
决于反应体系和反应条件的设置[2 ] 。我们在反应 条件可以显著地提高转基因检测的灵敏度。
条件的选择上根据引物中 GC 碱基所占比例和引物 该项研究为进一步进行转基因番茄果实及其它
长度计算退火温度 ,并进行退火温度试验 ,在提高扩 食品转基因检测方法的研究奠定了基础。
增灵敏度的同时 ,消除体系中非特异性扩增。
参考文献
3. 2 PCR 反应体系 PCR 反应体系的组成包含
十几种化学试剂 , 可以将其划分为六种基本组分 : 1 Mc Garvey Kaper , J . M ( 1991) A simple and rapid method for
水、PCR 缓冲液、dN TPs 、引物、Taq 酶、模板 DNA. screening tmnsgenic plant using the PCR. Biotechniques 11 :238 -
432
其中 ,前二种组分属于稳定因素 ,而其它四种组分却
2 Gustafson C. E , Alm R. A. Trust T.J . ( 1993) . Effect of heat de
具有极大的可塑性 ,其中任何一种组分浓度偏高都 naturation of target DNA on the PCR amplification. Gene 123 :241
会引起非特异性扩增 ,任何一种组分浓度偏低又会 - 244
[3 ,4 ] ( )
影响扩增的充分性 。本试验室在设置 PCR 反 3 Hung , T. , Mak , K 1990 A specific enhancer for polymerase chain
应体系前 ,认为对于一个稳定的扩增体系 ,对扩增模 reaction. Nucleic Acids Res. ]8. 4953
4 Kwok ,S , Kellog , D. E : ( 1990) Effects of primer - template mis
板含量应该容许一定的跨度 , 因止着重针对 dN TPs
matches on the polymerase chain reaction : human immunodeficiency
和引物两种组分有梯度地设置了 4 种 PCR 扩增体
virus type 1 model studies. Nucleic Acids Res. 18 ,999 - 1005
( )
系 ,试验结果 图 1 、2 表明 ,扩增体系 3 的各种组分 收
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