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黄曲霉毒素定性与定量检测方法概述 肖紫兰 ，罗 超 ，李逢慧 ，喻 凯 ，盛夏冰 (1．湖南农业大学 东方科技学院，湖南 长沙 410128；2．湖南农业大学动物医学院，湖南 长沙 410128) 摘 要：黄曲霉毒素(AFT)是一类真菌毒素，主要由黄曲霉和寄生曲霉产生，其对人畜健康、畜牧生产危害 极大，并引起世界各地及相关组织的高度重视，并纷纷规定了饲料中最高残留限量作为强制性标准使用。文章对 黄曲霉毒素检测的定性与定量方法进行 了概述。一 关键词：黄曲霉毒素；定性检测；定量检测 0 中图分类号：Q936；Q656：2iQ656；3 文献标识码：A 文章编号：i1001-0084(2008)12-0023-02 AFT是一类真菌毒素 ，包括 AFB、AFB、 l-3 LD50法 AFG1、AFG2、AFM1、AFM2等20多种…。其基本结 LD加法是利用AFT的毒性来检测的。试验对象 构都具有二呋喃环和香豆素。相对分子质量差别不 可以是动物，也可以是胚胎。AFT对禽类敏感生『高， 大，312~346不等。其中AFB、AFB2、AFG、AFG2 尤其是幼禽 (如鸭雏)，另外也适用于鸡胚，向鸡胚 由真菌代谢产生，而AFM、AFM 则由动物或人摄 的气室或卵黄囊中注入毒素，然后逐 日观察死亡情 入黄曲霉毒素后，在肝微粒体酶作用下经体内循环 况，通过受试群体的LD。来检测AFT的存在 。 代谢产生，存在于动物的代谢产物中，如乳汁、尿 1．4 组织培养法 液等。目前黄曲霉毒素检测方法有酶联免疫吸附法 组织培养法的原理是：黄 曲霉毒素可以抑制细 (ELISA)、薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法、微 胞的有丝分裂，从而抑制细胞生长。该方法在黄曲 生物法、半数致死量法 (LD。)以及组织培养法等。 霉毒素生物学检测中最为敏感。 1 AFT定性检测方法 1．5 其他方法 1．1 微生物法 除以上方法外，还有很多定性的检测方法。例 微生物法是 比较早的AFT检测方法，包括抑 如给动物喂养AFT，动物的肝脏出现癌变现象，从 菌试验和微生物遗传因子影响试验。抑菌试验是通 而判断AFT的存在。另外还可以根据 AFT抑制植 过AFT对某些微生物的生长的抑制作用来测定 物发芽来判断AFT的存在。 AFT的存在，由于巨大芽孢杆菌和短芽孢杆菌对 2 AFT定量检测方法 AFT敏感，可作为抑制试验对象。AFT也是噬菌体 2．1 酶联免疫吸附测定法 的诱导因子，可以增加溶菌性噬菌体的溶菌作用。 酶联免疫吸附测定法是免疫酶技术的一种 ， 1．2 荧光法 1966年建立了ELISA法，1971年又提出了用可溶 荧光法是利用AFT的荧光性来测定的，在紫 性抗原或抗体与固相载体结合，而保留免疫成分的 外光下，B族AFT发出蓝紫色荧光 ，G族 AFT发 反应性的酶联免疫吸附试验(ELISA)。由于这种方 出黄绿色荧光 。该方法可以应用于饲料中毒素的 法简便 、敏感、特异，可作为多种抗原或抗体的定 定性检测，最低检出量为5I-Lg·mL 培养基。 量测定 ，故而得到广泛应用。又有学者对 ELISA 法进行改进 ，使得检测灵敏度提高到0．01ng·mL～， 收稿 日期：2008—10～13 回收率为 80．1％ 103．6％，且此方法 已被AOAC 作者简介：肖紫兰 (1987一)，女，湖南邵阳人 ，研究方向为动