L-缬氨酸生产菌的选育及发酵条件的优化.pdfVIP

齐鲁药事 ·QiluPharmaceuticalAffairs2008Vo1． ! ：! ·745 · L一缬氨酸生产菌的选育及发酵条件的优化 赵丽丽 ，刘 忠 (鲁南制药集 团股份有限公司，山东 临沂 276006) 摘要 ：目的 研究 L～缬氨酸生产茵的选育及发酵条件的优化。方法 以黄色短杆菌 LNV10为 出发菌株 ，经紫外线、硫 酸二 乙酯逐级诱变处理 ，在含磺胺胍 (SG)、a～氨基丁酸 (—AB)、2一噻唑丙氨酸 (2一TA)结构类似物平板上定向筛选 ，通过 响应面分析对培养基 的组成进行优化 ，同时对发酵条件如温度 、pH值等进行 了探索 。结果 获得 L一缬氨酸高产菌株 LNV270，优化 了发酵条件 。结论 在最优条件下发酵 65h，可产 L一缬氨酸 46．89g ·L-。。 关键词 ：L～缬氨酸 诱变育种 条件优化 中图分类号：TQ460．38 文献标识码 ：A 文章编号：1672—7738(2008)12—0745—03 BreedingofL--valineproducingstrainandoptimum offermentationcondition ZHAO Li—li，LIU Zhong (LunanPharmaceuticalGroupLimitedCorporation，Linyi276006) ABSTRACT：OBJECTIVE L— va1ine— overproducingmutantwasderivedfrom Brevibacterium flavum LNV10，bymeans ofultravioletanddiethy1sulfate(DES)．METHODS Themutantwasselected directionallyandstepwiselyontheagarplates containingsufaguanidine(SG)，— aminoacid(a--AB)and2一thieny1一DL—alaine(2一TA)．Thefermentationmediumwasop— timizedbyresponsesurfaceanalysisandthefermentationconditionwasalsostudied．RESULTS ThehighbreedingstrainofL —valineLNV270wasobtainedandthefermentationconditionwasoptimized．CONCLUSION Undertheoptimum condition， themutantcouldproduceL—valine46．89g ·L_。afterfermentationfor65hours． KEY WORDS：L—valine；mutagenesis；conditionsoptimization L一缬氨酸作为分支链氨基酸之一，系人体必须氨基酸， 200~／g，VB1200~／g，琼脂粉 2．0，pH 7．0～7．20．1MPa压力 具有多种生理功能，主要用以配制复合氨基酸输液、合成多肽 下灭菌 30min。 药物和食品抗氧化剂等。近年来，人们发现L一缬氨酸是合 1．2．3种子培养基 (g·L )：葡萄糖 3O，玉米浆3O，酵母膏 成免疫抗生素的重要中间体，其年消耗量猛增。关于L一缬 8，尿素 1，KH?P( 1，MgSO40．4，MnSO40．01，Met0．5， 氨酸 的生 产在 国内外 已有 些报道 ，如 Katsurada1]、Tomi— VB1300~／g ·L～，生 物 素 200~／g ·L_。，pH7．0～ 7．2， ta[ ]、 中科院微生物研究所 以及沈阳药科大学 。等所报 0．1MPa压力下灭菌 lOmin。 道 的有关发酵法生产 L一缬氨酸的研究。我们以黄色短杆菌 1．2．4发 酵 培养