血脑屏障细胞模型的构建.pdfVIP

中 国 病 原 生 物 学 杂 志 2008年 12月 第3卷第 12期 · 894 · JournalofPathogenBiology December2008， Vo1．3，No．12 · 论著 · 血脑屏障细胞模型的构建 李江辉 ，潘长旺，胡昕，谭峰一 (温州医学院寄生虫学教研室 ，浙江温州 325035) 【摘要】 目的 建立一种稳定的、接近在体 内状态的 ICR小 鼠血脑屏障细胞模型。 方法 原代分离、纯化培养 ICR 小 鼠脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞 ，经显微镜观察细胞形态 ，Ⅷ因子和 GFAP免疫组化鉴定细胞类型，将此两种细 胞共培养构建血脑屏障细胞模型，经 4h渗漏试验、HRP通透性试验评价血脑屏障细胞模型功能。 结果 Ⅷ因子和 GFAP免疫组化分析显示原代培养的 ICR小 鼠脑微血管 内皮细胞和星型胶质细胞纯度分别可达 9O 和 95 ，细胞共 培养模型经 4h渗漏试验初步判断血脑屏障细胞模型形成、HRP通透性试验表 明血脑屏障细胞模型组同空 白组 比较具 有 明显的屏障作用 。 结论 原代分离、纯化出 ICR小 鼠脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞 ，利用细胞共培养技术构建 了血脑屏障细胞模型，其形态、结构及功能均接近在体状态 。 【关键词】 血脑屏障；细胞模型；ICR小 鼠 【中图分类号】 R一332 【文献标识码】 A 【文章编号】 1673—5234(2008)12—0894～03 [JournalofPathogenBiology．2008Dec；3(12)：894—896．] Establishmentofcellmodelofblood—brainbarrier IIJiang—hui，PAN Chang—wang，HU Xin，TAN Feng (WenzhouMedicalC0llegP，we h0“325035，Chin) [Abstract] 0bjective ToconstructakindofcellmodelofICRmousebloodbrainbarrier(BBB)whichissteadvand similartotheblood—brainbarrierinvivo． M ethods Brainmicrovascularendothelialcells (BMEC)andastrocytesce11s (AC)primarilyculturedfrom ICRmouse，Ⅷ factorandGFAPimmunocytochemistrywereusedtoidentifythem respec tively，thentheywereCOculturedincellcultureinserts． Results Ⅷ一factorandGFAP immunocytochemistryidentified thatthepositiveratesofBMEC andACwere90 and95 respectively．ThecellmodelofICRmouseblood—brainbarri— erhadasignificantlyrestrictfunctioncomparingtheblankgroupby4h leak testandHRP permeabilityexperiment ． Conclusion Theestablishmentinvitromodelofblood—brainbarrierhasthebasiccharacteristicsofBBB in o inmo