拟南芥谷氨酰tRNA合成酶同其相互作用蛋白VDAC的转录水平分析.pdfVIP

2011年 7月 四川大学学报(自然科学胶) July．201I 第 48卷 第 4期 JournalofSichuanUniversity(NaturalScienceEdition) Voi．48 No．4 doi：103969／j．issn．0490—6756．201I．04．044 拟南芥谷氨酰 tRNA合成酶同其相互作用 蛋 白VDAC的转录水平分析 张皖蓉 ，文国琴，童仕波，李旭锋，杨 毅 (四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室，成都 610064)) 摘 要 ：本研究在基于前期对拟南芥VDAC(电压依赖性 阴离子通道蛋 白质)与AtGluRS(谷 氨酰 tRNA合成酶)两种基 因的过量表达和抑制表达转基 因突变体株系的初步生理性状分析 基础上，对筛选获得的转基 因T1代植株 以及拟南芥 abil、abi2突变株 ，进行转录水平两种蛋 白特异性基 因片段的地高辛标记 Northern杂交 以及半定量 RT-PCR分析．结果显示，在拟南 芥 abil、abi2突变株 中，VDAC和 AtGluRS两种基 因的转录表达均收到不 同程度的抑制 ；而 VDAC与 AtGluRS两种基 因之 间存在 间接或直接的正调控关系，进一步证 明了两种基 因在 转录水平上存在着密切联系． 关键词 ：谷氨酰 tRNA合成酶；VDAC；半定量分析；Northern杂交 中图分类号 ：Q78 文献标识码 ：A 文章编号：0490—6756(2011)04—0967—06 Analysisoftranscripti0naIlevelofAtGIuRSandtheinteracting protein VDAC inArabidopsisthaliana ZHANGWan-Rong，WEN Gong—Qin，TONGShi—Bo，LrXu—Feng，YANG Yi (KeyLaboratoryofBio—resourceandEco—environmentofMinistryofEducation， CollegeofLifeSciences，SichuanUniversity，Chengdu610064，China) Abstract：Basedonprimitivephysiologicaltraitsstudyoftheoverexpressionandsuppressiontransgenic linesofVDACandAtGluRSinArabidopsisthaliana，analyzedthemRNA transcriptionIevelofthese一 1ectedT1generationofthetwotransgenic1inesandabilandabi2mutantsthroughNorthern blotand semiquantitativeRT—PCRofspecificgenes．ItisrevealedthatthegenetranscriptionofVDAC andAt— G1uRShadbeeninhibitedinordinatelyinabilandabi2mutants．Andpositiveregulationwasexisteddi— rectlyorindirectlybetweenVDAC andAtGluRSaswell，whichhadbeenprovedthecloserelationship atthetranscription leve1betweenVDACandAtGluRSinArabidopsisthaliana． Keywords：GluRS，VDAC，RT—PCR，Northernblot 质 ，具有催化 tRNA结合氨基酸 、促进 tRNA 的成 1 引 嗣 熟和校正等作用