微小隐孢子虫重组蛋白CP21的免疫特性.pdfVIP

吉林农业大学学报 2011，33(5)：571～575 http：／／xuebao．jlau．edu．cn JournalofJilinAgriculturalUniversity E—mail：flndxb@rip．sina．corn 微小隐孢子虫重组蛋 白CP21的免疫特性 任保彦，陈玉兰，宫鹏涛，李建华，杨 举，张西臣“ 吉林大学畜牧兽 医学院，长春 130062 摘 要 ：采用 微小隐孢子 虫 CP21基 因的原核表 达蛋 白的抗 血清对微 小隐孢子虫感 染 HCT一8细胞进行 了体 夕F阻断试验 ，检测不 同浓度抗血清对 HCT一8细胞感染隐孢子虫感染率睁移呐。恫 时应用纯化 的重组 CP21 蛋 白对小鼠进行免疫，检测体液免疫水平和细胞免疫水平的变化。对免疫后的小鼠接种微小隐孢子虫，检测 重组CP21蛋 白对微 小隐孢子虫感染 的保护效 果。体外 阻断试验结果 显示，在培养基 中分别加 入 1％、2％、5％ 和 10％的抗重组 CP2l蛋 白鼠血清时 ，HCT一8细胞感染 隐孢子虫的平均感染率 由82．O％分别下 降到41．1％、 35．2％、30．6％和 23．5％；动物保护性试验体液免疫水平检测发现，试验组血清 中IgG滴度 随免疫次数增加而 逐渐升高 ，第3次免疫后 IgG滴度 与对 照组相 比差异均极显著 (P0．01)；细胞免疫水平检测证 明CD4 ／ CD8 T淋 巴细胞数值与对照组相 比差异均极显著(P0．01)；攻虫保护试验结果表 明试验组与对照组相比卵 囊排 出量显著减少 (P0．05)，卵囊排 出持续 时间平均缩短4d，减虫率达 38％。体 内外试验结果表 明：CP21 基 因可用于作 为预防和治疗 隐孢子 虫病 的有效靶位点基 因。 关键词 ：微小隐孢子虫；黏附相关蛋 白；CP21重组蛋 白；免疫特性 中图分类号 ：$852．7；R38 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000—5684(2011)05—0571—05 DOI：CNKI：22— 1100／S0926．001 网络 出版地址 ：httD：／／www．cnki．net／kcms／detail／22．1100．S0926．001．html 引文格 式 ：任保彦 ，陈玉兰 ，宫鹏涛 ，等 ．微小隐孢 子虫重组蛋 白CF2I的免疫 特性 [J ．吉林 农业 大学 学报 ， 2011，33(5)：571—575． ImmunityCharacteristicsofSurfaceAdhesion Protein CP21on Sporo- zoitesand OocystsofCryptosporidium parvum REN Bao—yan，CHEN Yu—lan，GONG Peng—tao，LIJian—hua，YANG Ju，ZHANG Xi—chen CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine，JilinUniversity，Changchun130062，China Abstract：In vitro，theblockingtesthasbeenadopted toresearch thequantificationofHCT一8 infected bydifferentanti—CP21seraratio．Invivo，ithasbeenidentifiedtheimmuneprotectioneffectsofCP21in micebyobservingthelevelofspecificantibody IgG titersin seurm ，thechangesofspleen CD4 and CD8 T lymphocyteand dynamicsofCryptosporidium parvum oocystssheddingandSOon．Theblocking testinvitroshowedthatwhenadding 1％ ，2％ ，5％ ，and 10％ anti—CP21protein immuneserum into standardmain