小麦TaCRF2基因的克隆及其在烟草中的初步功能验证.pdfVIP

作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2011，37(8)：1389—1397 http：／／www．chinacrops．org／zwxb／ ISSN 0496—3490；CODEN TSHPA9 E—mail：xbzw@chinajourna1．net．ca DoI：1O．3724／SP．J．1006．2011．01389 小麦 TaCRF2基因的克隆及其在烟草中的初步功能验证 郭丽香 ，2 高世庆2， 唐益苗2 王永波2 刘美英 张 朝 徐 蓓 2 赵 昌平 2， 首都师范大学生命科学学院，北京 100048； 北京市农林科学院杂交小麦工程技术研究中心，北京 100097； 中国科学技术大学研究 生院化学系，安徽合肥 230026 摘 要：通过 RT-PCR方法从小麦 cDNA中扩增获得 1个锌指蛋 白基因 TaCRF2，该基因的cDNA长度为 843bp，序 列分析表明它编码 1个含有 280个氨基酸的蛋 白质。在线软件预测该蛋 白质的相对分子质量为 30．97kD，等电点为 7．03，且在 C一末端含有 1个典型的RING—H2型锌指蛋 白结构域，在N一末端含有 2个跨膜结构域。氨基酸序列比对发 现，TaCRF2与水稻 中1个RING型锌指蛋 白(ABF95226)的相似度为 82％。亚细胞定位分析显示，该蛋白分布在细胞 核和细胞膜上。real—timeRT-PCR表达特性分析显示，TaCRF2基因的表达受干旱、高盐和外源ABA的强烈诱导，低温对 该基因的表达量影响不明显。初步功能验证发现过表达TaCRF2基因增强了转基因烟草对干旱和高盐胁迫的耐性。 关键词：烟草；小麦；RING—H2型锌指蛋白；TaCRF2基因；干旱胁迫；盐胁迫 吼 CRF2GeneIsolationfrom Triticum aestivum andPrimaryFunctionValida- tioninTobacco(NicotianatabacumL．、I GUOLi—Xiang，，GAOShi．Qing，，TANGYi—Miao，WANGYong—Bo2，LIUMei—Ying，ZHANGZhao， XU Bei一．andZHAO Chang—Ping， CollegeofLifeSciences，CapitalNormalUniversity，Beijing100048，China；BeijingHybridWheatEngineeringandTechnologyResearchCenter, BeijingAcademyofAgricultureandForestrySciences，Beijing100097，China；DepartmentofChemistry,GraduateSchoolofUniversityofScience nadTechnologyofChina．Hefei230026．China Abstract：Wheat，likeothercrops，suffersfrom drought，salt，low—temperatureandotherabioticstresses，seriouslyresultingin yielddecline．Itisaneffectivewayforcropbreedingtoimproveresistanceviamolecularbiologytechniques．Zincfingerprotein， na importanttrna scriptionfactorcommonlyfoundinplant．canregulatetheexpressionofmultiplesrtess—induciblegenesand enhancecomprehensiveresistanceseffectively．Inthisstudy,aRING—H2zincfingerproteingene．designatedas zC兄 ．was isolatedfrom Tr／ticum aestivum byRT_PCR．ItscDNA was843bpandencodedaputativeproteinof280aminoacidswithapre— dictedmoleculra massof30．97