moFcγRⅢ、γ链真核表达载体的构建及其共转染稳定细胞系的建立.pdfVIP

河 南农 业科 学 ，2011，40(8)：190—193 JournalofHenanAgriculturalSciences moFcyRⅢ、链真核表达载体 的构建及其 - ． H-． ／ 、 转染稳定细胞系的建立 席 俊 ，唐志鹏 ，张利娜。。宋爱宾。，王少兵。，张改平 (1．河南T 、I大学 粮油食品学院，河南 郑州 450052；2．福 山区畜牧局 ，山东 福山 265500； 3．招远市畜牧局 ，山东 招远 265400；4．河南省农业科学院 农业 部动物免疫学重点开放 实验室 ／河南省动物免疫学重点实验室 ，河南 郑州 450002) 摘要 ：将 moFcTRⅢ、7链编码区cDNA分别亚克隆到真核表达载体 pcDNA3的 巨细胞病毒启动 子下游，构建了重组表达质粒 pc3moRⅢ、pc3moy；用PvuI线性化重组质粒，以线}i4Jc．重组质粒共 转染COS一7细胞，用玫瑰花环试验检测 moFcTR11I在转染细胞表 面的表达 ，通过 G418抗性筛选 和单细胞克隆，在转染细胞表面稳 定表达 了moFcTRⅡJ受体分子。稳 定转染细胞 系的建立和 moFcTRllI受体分子基因的表达，为进一步研究 moFcTRⅢ的功能提供 了基础 。 关键词：moFcTRⅢ；COS一7细胞 ；玫瑰花环试验；真核表达 ；共转染 中图分类号：Q785 文献标识码 ：A 文章编号：1004—3268(2011)08—0190—04 EstablishmentofaCellLineC0transfectedwithaEukaryotic ExpressionVectorStablyExpressingmoFcTRⅢ and了Chain XIJun ．TANG Zhi—peng ，ZHANG Li—na ，S()NG Aibin。， W ANG Shao—bing ，ZHANG Gai—ping (1．SchoolofFoodScienceandTechnology，HenanUniversityofTechnology，Zhengzhou450052，China； 2．FushanBureauofAnimalHushandry，Fushan265500，China； 3．ZhaoyuanBureauofAnimalHusbandry，Zhaoyuan 265400，China； 4．KeyLaboratoryforAnimalhnmunologyoftheM inistryofAgrcuhure／HenanProvincialKeyLaboratoryof AnimalImmunology，HenanAcademyofAgriculturalSciences，Zhengzhou450002，China) Abstract：ThecDNA forthecompleteencodingregionofmoFcvRⅢ and7chainwereseparately clonedintothemammalianexpressionvectorpcI)NA3to constructexpressingplasmids，pc3moR Ⅲandpc3mo7．C()S一7cellswerecotransfectedwiththelinearexpressingplasmids，selectedby G418anddetectedbyrosetteassayfortheexpressionofmoFcyR11I．Theestablishmentofthe stablytransfectedcelllineexpressingtargetgeneprovidesabasisforfurtherstudiesonthefunc— tionofthemoFc7R