胶质瘤干细胞趋化神经干细胞迁移及其机制研究.pdfVIP

· 1412 · 中堡塞验 杂圭 笙 月第28卷第9期 ChinJExpSurg。Setatember2011V01．28．No．9 ． · 卒申经 夕卜科 · 胶质瘤干细胞趋化神经干细胞迁移及其 机制研究 张所军 胡峰 谢蕊繁 王宝峰 叶飞 万锋 郭东生 雷霆 【摘要】 目的 观察神经干细胞(NSC)向胶质瘤干细胞(GSC)及其分化细胞的迁移能力，探 讨其趋化机制。方法 干细胞条件培养 U251和3例原代胶质瘤干细胞 ，以流式细胞术和 Western blot对其鉴定；Transwell小室法检测GSC和其分化细胞条件培养液 (CM)对NSC迁移的趋化能力； 酶联免疫吸附试验 (ELISA)法检测CM中血管内皮生长因子 (VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的分泌水平，并以表皮生长因子(EGF)、bFGF为对照分析CM对NSC的化学趋化作用；进一 步以Dio和Dil分别标记NSC和GSC，体外混合培养观察NSC向GSC的迁移、以及对肿瘤干细胞球 生长的影响。结果 干细胞培养条件下的胶质瘤干细胞球，高表达干细胞标志物 Nestin和／或 CD133(11．02％一33．55％)；分化后干细胞标志物表达下降，分化标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP) 表达增加(P0．05)；GSC与其分化细胞比较 ，分泌高水平的趋化因子VEGF和bFGF(P0．05)，并 对NSC有高度趋化能力；体外混合接触培养也显示NSC向肿瘤干细胞球的迁移和包绕，并且能够显 著抑制肿瘤干细胞球的生长(P0．05)。结论 GSC体外可趋化NSC向其迁移，其趋化作用较分化 的肿瘤细胞更为显著 ，并且与其分泌高水平的生长因子有关；向肿瘤干细胞球迁移的NSC可抑制其 体外生长 。 【关键词】 神经干细胞；胶质瘤干细胞；迁移；趋化因子 Roleofchemotacticfactorsingliomastem cellsinducingthemigrationofneuralstem cellsinvitro ZHANGSupun，HUFeng，XIERui-fan，WANGBao_Je1r喀，YEFet，WANFeng，GUODong—sheng，LEI Ting．DepartmentofNeurosurgery， ， Hospital，TongfiMedicalCollege，HuazhongUniversityofScience andTechnology． Ⅺn D∞0．China Correspond ingau琥or： Ⅳ ， ，Email：wanruiyan@hotmail．con A【bstract】 0bjective Toobservethemigrationofneura]stemcells(NSCs)togliomastemcells (GSC)．andtoinvestigatethechemotacticmechanism．Methods GSCswereculturedandexpandedin stem cellmedium from humangliomacelllineU251andsurgicallyresectedspecimensofhumangliomas． A11theGSCswereidentifiedbyusingflow cytometryandW esternblotting．MigrationsofNSCstoGSCs． differentiatedceUsandconcentrationgradientfluidofrgowthfactorsweredetectedbvTranswellassay．Con— centrationsofvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)andbasicfibroblastgrowthfactor(bFGF)secre— ted byGSCsand differentiated cellswere de