磷酸盐含量对银柴胡细胞培养生长与生理特性的影响.pdfVIP

一 66一 江苏农业科学 2008年第6期 磷酸盐含量对银柴胡细胞培养生长与生理特性的影响 吴晓玲 ，邓光存 (宁夏大学生命科学学院，宁夏银川 750021) 摘要：研究培养基中磷酸盐含量变化对银柴胡细胞培养生长及生理特性的影响。结果表明：M2培养基[MS(KHP04255mg／L)+ 6一BA0．5mg／L+NAA0．5mg／L+2，4一D0．5mg／L]的银柴胡细胞培养细胞鲜重、细胞干重、细胞数 目均明显高于其他培养基配方， 培养细胞的硝酸还原酶和SOD的活性也显著提高，说明磷酸盐(KHPO)含量为255mg／L时更有利于银柴胡细胞的悬浮培养。 关键词：银柴胡；细胞培养 ；磷酸盐 ；细胞生长；生理特性 中图分类号：$567．230．1 文献标志码 ：A 文章编号：1002—1302(2008)06—0066—03 银柴胡(StellariadichotomaL．Vat．1anceolataBge)，又名 化生产 ，有利于银柴胡野生资源的保护、合理利用及可持 披针叶繁缕，是石竹科繁缕属多年生草本植物…。其根经干 续发展。目前，国内外有关银柴胡组织培养特别是细胞培养 燥后入药称 “银柴胡”，具有清虚热、除疳热作用 ，用于治疗 方面的研究报道不多，加强该方面研究很有必要。 肝肾阴虚、骨蒸潮热、盗汗、小儿疳积发热、饮食积滞或肠内虫 本研究重点就银柴胡细胞培养过程中，培养基磷酸盐含 积 日久损伤脾胃所致的疳积发热等症。主产于宁夏、甘肃、内 量对银柴胡细胞的生长特点及其生理特性的影响进行系统分 蒙等地。近年来随着国内外需求量猛增，使得多处产区毁草 析，以期为提高银柴胡细胞培养产量及有效成分含量、进行大 开田 ，野生资源遭到严重破坏，已濒临灭绝。银柴胡的药 规模工业化生产提供技术支持。 用成分甾醇主要在根部，但其种植及生长周期较长，利用细胞 1 材料与方法 培养和有效成分提取可缩短药物生产周期，并能实现工厂 1．1 供试材料 收稿 日期：2o08一O5一l2 银柴胡种子盆栽成苗 1个月后，以叶片为外植体接种到 基金项 目：宁夏 自然科学基金 (编号：NZ0703)；宁夏教育厅项 目(编 MS培养基中，培养基配方为 MS+6一BA0．5mg／L+NAA 号：JY2006110)；宁夏大学 自然科学基金(编号：ZR0618)。 0．5mg／L+2，4一D0．5mg／L，于 (25±1)℃，黑暗条件下诱 作者简介：吴晓玲(1973一)，女，硕士，副教授，从事细胞工程方面的 导出疏松的愈伤组织备用。 教学与研究工作。Tel：(0951)2062129；E—mail：wuxiaol@nxu． edu．cn (上接第65页) 资源的遗传多样性[J]．农业生物技术学报，2006，14(4)：585～ 浓度、dNTP浓度略有提高，Mg“浓度不变，TaqDNA聚合酶 593． 浓度有所降低。反应程序在扩增时间与循环次数上与魏玉清 [5]孙晓东，李 军，施京红．枸杞基因组DNA的提取与分析[J]． 等研究也有差异。试验结果表明：(1)枸杞属 RAPD反应体 陕西中医，2003，24(12)：l129—1130． [6]李树华，何 军，杨淑琴，等．野生稻、野燕麦、枸杞DNA的提取 系中，模板浓度、引物浓度、dNTP浓度、 DNA聚合酶浓度