基质固相分散萃取-高效液相色谱-串联质谱法分析拟南芥中的赤霉素.pdfVIP

· 924 · 色 谱 第 29卷 Keywords：matrixsolid—phasedispersionextraction；highperformanceliquidchromatography— tandem massspectrometry(HPLC—MS／MS)；gibberellins；Arabidopsisthaliana 赤霉素 (gibberellins，GAs)是植物激素 的一 类健康 不利。近年来发展起来 的基质 固相分散 种 ，作为植物生长 的必需激素之一，GAs调节植物 (matrixsolid—phasedispersion，MSPD)技术将提 生命循环 的整个阶段。第一种被分离鉴定的赤霉素 取和净化步骤合二为一 ，具有简便 、灵活 、快速 、低耗 称为赤霉酸 (GA )，是～类二萜酸。到 目前为止，已 等优点 ，已被广泛应用于药物 “、农药 、天然 经在植物 、真菌和细菌中发现 了 136种不同结构的 成分 、复杂植物 和动物 ¨，。。样 品中组分 的分 赤霉素，但 只有少数具有生物活性 ，如 GA 、GA 、 析 ，但将该方法用于植物 中赤霉素的测定还 未见报 GA 和 GA 。本文所研究的 GA 、GA 和 GA 的结 道 。拟南芥是一种常用的模式植物 ，它的完 整基 因 构见 图 1。GAs的排序并非按 照其 结构关系 ，而是 组 已被成功地测定 。测定不 同生长期拟南芥样 以发现的顺序来排序的。由于 GAs缺乏特定 的光 品中赤霉素的含量和分布，是研究赤霉素在植物生 学特性和化学特性 ，难 以形成专一的化学测定方法 ， 长过程中的作用和机理的重要手段。本文将 MSPD 因此对 GAs的定量分析一直非常困难 。 用于拟南芥样品的前处理，并结合 HPLC—MS／MS， 建立了MSPD—HPLC—MS／MS测定拟南芥 中痕量赤 霉素 GA．，GA 和 GA 的分离检测方法 ，且成功地 用于拟南芥地上部分中这3种 GAs的测定 。 HO HO 0 1 实验部分 GA GA3 1．1 主要仪器与试剂 AgilentHPLC—UV 1200三重 四极 杆 串联质 谱 仪 6460(美 国Agilent公司)；氮吹仪 (中国上海安谱 Ho 公司)；冷冻干燥机 (中国北京博 医康实验仪器有限 O 公司)。C18柱 (50 m，6nm ，Dikma公司)；尼龙 GA4 注射器滤器 (4mm，0．45 m，美国NationalScien— 图 1 GA1、GA3和 GA4的化学结构 Fig．1 ChemicalstructuresofGA1，GA3和 GA4 tific公司)；甲醇 、乙腈 、甲酸 、正 己烷 (色谱纯)；水 为娃哈哈纯净水 (中国杭州娃哈哈公司)。 目前检测 GAs的方法主要有 高效液相色谱法 拟南芥 由中国科学院植物研究所信号转导 与代 (HPLC