夹竹桃叶乙醇提取物对斑马鱼的毒性评价.pdfVIP

第35卷 第5期 水 生 生 物 学 报 Vo1．35，N 0．5 2011年 9月 AC1Al HYDROBIOLOGICA SINICA Sep．， 20 11 D0I：10．3724／SP．J．1035-2011．00835 夹竹桃叶乙醇提取物对斑马鱼的毒性评价 陈建明 何月平 张珏锋 陈列忠 (浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所，浙江省植物有害生物防控重点实验室 省部共建国家重点实验室培育基地，杭州 310021) 摘要：研究表明，夹竹@~(Nerium indicumMil1．)及其提取物对多种害虫具有较强的毒杀作用，已在害虫生物 防治中显示出较大作用。为了合理开发夹竹桃植物，需要进一步评价夹竹桃植物对水生生物的安全性和对动 物的毒理学。文章利用索氏提取法提取夹竹桃叶乙醇粗提物，并进一步用氯仿萃取浓缩 、硅胶柱层析方法提 取分离乙醇精提物，经鉴定为强心甙组分 。在此基础上，委托浙江省医学科学院评价了乙醇粗提物对实验动 物的毒理学，并采用静态法评价了这二种提取物对斑马鱼(Brachydaniorerio)的急性毒性和慢性效应。结果表 明：夹竹桃叶乙醇粗提物的提取率为 45％，乙醇精提物(主要成分为强心甙组分)的提取率为 O．25％。乙醇粗 取物对大 鼠经 口和经皮毒性为低毒级，对家兔皮肤和眼无刺激，对豚 鼠的致敏反应属弱致敏性。这说明夹竹 桃叶乙醇粗提物对哺乳动物十分安全。在急性毒性试验中，发现斑马鱼的死亡率与提取物处理浓度和处理时 间均呈明显的正相关 。处理浓度越大，斑马鱼的死亡率越高；同一浓度处理时间越长，死亡率越高 。用 24mg／L乙醇粗提物处理 6、12、24和48h的死亡率分别为26．67％、60％、91．11％和95．56％；用 0．5mg／L 乙醇精提物处理 12、24、48、72和 96h的死亡率分别为 6．25％、33．33％、52．08％、54．17％和 60．42％；用 24mgL／乙醇粗提物处理 96h或 32mg／L处理48h，或者用 1mg／L乙醇精提物处理24h，斑马鱼全部死亡。 在慢性毒性试验中，用 3．33—10．0mg／L乙醇粗提物处理斑马鱼28d，其死亡率为 12％一20％。乙醇粗提物处 理斑马鱼后，急性毒性LC50=12．52mg／L(药后 96h)10mg／L，慢性毒性 LC50=199．51mg／L(药后 28d)；乙醇精 提物处理斑马鱼后，急性毒性LC5o=0．46mg／L(药后 96h)1mgL／，根据 《化学农药环境安全评价试验准则》 (1990)中农药对鱼类的毒性分级标准，说明夹竹桃叶乙醇粗提物对斑马鱼的毒性属于低毒，比较安全；乙醇 精提物对斑马鱼的毒性则为高毒，十分不安全。 关键词：夹竹桃叶；乙醇提取物；斑马鱼；毒性评价 中图分类号：X173 文献标识码：A 文章编号：1000—3207(2011)05．0835—06 夹竹~,(Nerium indicumMil1．)为夹竹桃科夹竹 杀线虫和杀钉螺作用 [3，。我们的研究表明，夹竹桃 桃属常绿直立灌木。在我 国长江以南各地广泛种植， 叶乙醇提取物对福寿螺也有显著的毒杀作用I5，刚。虽 多栽培在路旁、庭院、公园、河堤、湖畔等地。夹 有夹竹桃提取物对鱼的毒性试验，但对实验动物 竹桃对多种害虫具有 胃毒 、触杀、拒食 、抑制生长 鼠、兔等的毒性如何未曾评价。为了从夹竹桃植物 发育等作用，能吸收空气 中有害气体 以净化环境， 中开发植物源杀螺剂，非常有必要评价其毒理学。 并具有重要 的药用价值_1]。 有关农药对鱼类的安全性，国际上常用试验鱼 研究表明，夹竹桃全株或其根 、茎 、叶、花提 种有斑马鱼、鲤鱼、夏裨鱼、黑头软 口鲦、翻车鱼 取物对棉花害虫(棉铃虫)、水稻害虫(二化螟、稻飞 等 【。目前夹竹桃提取物对鱼类的安全性评价仅见 虱)、蔬菜害虫(菜青虫、蚜虫)以及储粮害虫(米象、 何