DSX对高眼压大鼠视网膜神经节细胞的保护作用研究.pdfVIP

维普资讯 第23卷 第11期 中 医 药 学 刊 Vo1．23No．11 2005年 11月 CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHlNESE MEDICINE NOV．，2005 文章编号：1009—5276(2005l11—1935—03 DSX对高眼压大鼠视网膜神经节细胞的保护作用研究 段俊国 ，路雪婧 ，廖品正 ，曾洁萍。 (1．成都中医药大学眼科实验室，四川成都 610075；2．成都中医药大学眼科教研室，四川 成都 610075； 3．成都中医药大学2004级博士研究生。四川 成都 610075) 摘 要：目的：观察中药提取物 DSX对 高眼压大 鼠视网膜一氧化氮 (NO)含量 以及视网膜神经节细胞 (RGCs)凋亡率的影响。方法：采用Akira法，烙闭大 鼠上巩膜静脉，制作大鼠持续性高眼压模型，予中药提取 物DSX进行治疗一个月。结果：DSX能一定程度阻止眼压升高，降低大 鼠视网膜中NO的含量。减少视网膜 神经节细胞的凋亡。结论：DSX能有效保护高眼压下的视网膜神经节细胞。 关键词：青光眼；视网膜神经节细胞；一氧化氮；中药；细胞凋亡 中图分类号：l毪一03 文献标识码：B 青光眼是由多种因素引起的以进行性视神经损害为 去上清液后加入 lmL70％冰酒精 (4℃)固定，送四川大 特征的主要致盲眼病之一，一直以来因其不可逆性致盲 学华西医学中心进行流式细胞仪检测。采用碘化丙锭 而备受关注。青光眼视神经损害的确切机制 目前尚不十 (propidiumiodide，PI)染色法。 分清楚，但对青光限的机理研究表明可能有多种机制参 ③视网膜NO含量测定 过量麻醉大 鼠。立即取出 与青光眼性视神经损伤，而无论何种机制，其最终的结局 眼球，在冰块上 (4℃)，显微镜下沿角巩膜缘前约 0．5～ 均是视网膜神经节细胞 (retinalgangli0ncells，RoCs)的 lmm处剪开角膜，去晶体、玻璃体。然后沿锯齿缘剥离视 凋亡 l【J。因此调控 RGcs凋亡对青光眼视神经保护具有 网膜，立即称重，加入 1mL生理盐水。充分匀浆。3000r／ 重要意义。根据青光眼的血流学说，本实验观察了中药 min离心 15min，取上清液冷冻，送成都中医药大学附属 提取物DSX对持续性高眼压大 鼠RGCs的保护作用。 医院生化室，采用硝酸还原酶法测定。 1 材料与方法 1．4 统计方法 采用单因素方差分析，其中两两比较采 1．1 实验动物 SD雌性大 鼠8～12周龄 40只。体重约 用 LSD法 。 150～200g，均符合一级动物标准。饲料为全价鼠颗粒饲 2 实验结果 料。大鼠及饲料均 由成都中医药大学实验动物中心提供 2．1 眼压测量 见表 1。 (生产合格证：川实动管质第99—11号)。纳入标准：① 表 1 各组大 鼠组间及造模 用药前后 无眼部病变。②双眼瞳子L直接对光反射和间接对光反射 眼压比较 ( ±S，mmHg) 正常。 眼数(只) 造模前 造模后用药前 用药后一个月 1．2 实验方法 ①动物分组及给药 随机选取 8只大 鼠作为对照组，其余32只进行双眼造模，造模后随机分 为模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组各 8只。各组 动物均 自由摄水饮食。高、中、低剂量组于造模后第2天 开始给药，分别予每 100g体重 DSX0．028g、0．014 0．007g(相当于成人 日用量的20倍、10倍和5倍)