EGCG降低P糖蛋白表达逆转白血病多药耐药的研究.pdfVIP

维普资讯 EGCG降低P糖蛋白表达逆转白血病多药 耐药的研究 赵 芳，张茂宏，陈学 良，李丽珍，赵川莉，王鲁群，彭 军 (山东大学齐鲁医院．山东 济南 250012) 摘 要：『目的1探讨表没食子儿茶素没食子酸酯[f一)epigallocatechin一3一gallate，EGCG]对人白血病细胞 K562／ A02多药耐药性的逆转作用及相关机制。方『法1采用Mrr法确定EGCG的非细胞毒性剂量，以及对K562／A02 细胞药物敏感性的影响。以流式细胞术测定EGCG作用前后细胞内阿霉素浓度的变化；同时采用半定量逆转录 聚合酶链反应 (RT．PCR)及Westernblot方法分别检测经典多药耐药基因(MDR1)mRNA及其产物P糖蛋h的 表达。结『果1EGCG在低于 l03．2}xmol／L时对K562A／02细胞的生长抑制率小于 l0％。40p~mol／L、60p~mol／L及 80~mol／LEGCG均可增加 K562／A02细胞对阿霉素的敏感性 ，使阿霉素对 K562A／02细胞 的IC 由原来的 ll3．34}xg／ml降低至9．661,g／ml、7．67}xg／ml和4．68tLg／ml，其逆转倍数分别为 l1．73、l4．77和24-23倍。流式细胞 术结果表明EGCG可增加细胞内阿霉素浓度，并呈剂量依赖性：RT—PCR及Westernblot结果显示不同浓度的 EGCG均可抑制 K562A／02细胞 MDRlmRNA及P糖蛋fLl的表达．．结『论1EGCG可部分逆转人白血病细胞K562／ A02对阿霉素的耐药性，其逆转机制与增加细胞内化疗药物浓度、抑制经典多药耐药基冈MDRlmRNA及其产 物 P糖蛋 白的表达有关 关键词：儿茶素：耐药性 ；P糖蛋白；白血病 中图分类号 ：R733．7 文献标识码 ：A 文章编号：l67l—l70X(2040)06—0389—04 MDR--reversingEffectofEGCG byDecreasingExpressionofP·G·lycopro-- teinonHumanLeukemicCellLine ZHAOFang，ZHANGMao—hong，CHENXue—liang，eta1． (QiluHospitalofShmMongUniversit),Jinan250012，China) Abstract： P『urpose1Toinvestigatethereversaleffectoff一)epigallocatechin一3一gallatefEGCG)onhumanleukemic K562／A02celllineanditspossiblemechanisms。 M『ethods1CytotoxieityofEGCGanditssensibilitytodoxorubiein fDOX)inK562／A02cellline，aDOX—resistancecelllineofhumanleukemia．wereevaluatedbyMTFassay．Theintra— cellularconcentrationofD0Xwasdetectedbyflowcytometry。BeofreandafterEGCGwasgiven， theexpressionsof MDRlmRNA andP—glycoproteinweredetectedbysemi—quantitativereversetranscriptase—polymerasechainreaetion (RT—PCR)andWesternblotrespectively．R【esults1The10％inhibitionconcentration(IClo)ofEGCGtoK562／A02cell linewas103．2}xmol／L， so40~mol／L， 60~mol／Land80p~mol／LEGCGwereusedtodetectthereversaleffectofmul— tidrugresistance．TheIC∞forDOXwasll3．34}xgm／land1．12 mlofrK562A／02andK562／Scelllinesrespectively． Theresistancefactorwasl0l-2一f0ld．EGCG couldinereasethedrugsusceptibilityofK562A／02cellstoDOX．andat concentrationsof40~mol／L，60~mol／Land80~mo