HCV CE2融合蛋白在家蚕培养细胞、蚕幼虫中的表达及其初步应用.pdfVIP

维普资讯 792 第四军医大学学报(JFou~hMilMe ni!! ； (2 巳； · 研究原著 · 文章编号：1000-2790(2005)09-0792-04 HCVCE2融合蛋白在家蚕培养细胞、蚕幼虫中的表达及其初步应用 王克霞，汪雪峰，彭江龙，梁 勇 (安徽理工大学医学院病原生物学教研室，安徽淮南232001) Expression ofHCV CE2fused protein pBacPAK8，构建重组转移载体pBacPAK-CE2，与经线性化修 饰的家蚕核型多角体病毒(BmNPV)DNA共转染家蚕培养细 inculturedcellsandlarvaeofsilkworm 胞株 ，构建重组病毒．双酶切及PCR鉴定重组病毒基 因组 中 andinitialapplication 目的片段的表达．重组病毒感染BmN细胞株及五龄家蚕幼 虫后，SDS—PAGE分析细胞培养上清、细胞抽提物及幼虫体液 WANG Ke—Xia，WANG Xue—Feng，PENG Jiang—Long，HANG 样品中，HCVCE2融合蛋 白的特异性条带．并用间接 ELISA Yong 法初步检测表达产物的生物活性．结果：双酶切及PCR鉴定 DepartmentofPathogenicMicrobiology，SchoolofMedicine，An— 重组病毒基因组含有约 1．6kb的目的片段 ，重组病毒感染后 huiUniversityofScienceTechnoloyg ，Huainan232001，China 的BmN细胞培养上清、细胞抽提物及幼虫体液样品中，均可 见一 约90X10 的特异性条带 ；用间接ELISA检测证明表 A【bstract】AI~I：TohighlyexpressHCVCE2fusedprotein 达产物具有较好的免疫原性．结论 ：HCVCE2融合基 因在家 andtostudy itsinitialapplication．METHODS：A recombi- 蚕培养细胞及蚕幼虫中获得了高效表达 ，并具有生物活性，为 进一步进行疫苗的研究及临床诊断试剂的开发奠定基础． nanttransfervectorpBacPAK-CE2，containingtotalcDNA 【关键词】肝炎病毒；CE2融合蛋白质类；重组杆状病毒；蚕； OfCE2genewith2aHCV strain．wasconstructedandco- 细胞，培养的；幼虫 transfected into BmN cells with lineadzed BmBacPAK 【中图号】R373．2 【文献标识码】A (modifiedBmNPV)DNAfortheconstructionofarecombi． nantbaculovirusac rryingCE2 fused gene．The recombi- nantswereid