猪口蹄疫病毒受体β3亚基的基因克隆与分子特征.pdfVIP

中国人兽共 患病 学 报 358 ChineseJournalofZoonoses 2Ol2，28 (4) 文章编号 ：1002—2694(2012)04—0358—05 猪13蹄疫病毒受体 I]I3亚基的基因克隆与分子特征 吕占禄 ，王光祥，尚佑军，刘湘涛 摘 要 ：目的 为研 究B3亚基在 口蹄疫感染过程 中所扮演的角色 ，同时也为进一步深入研究 FMI)V 嗜性、与循主细胞 的 相互作用 、病毒 的侵入机制等问题奠定基础 。方法 从正常的绪 肾细胞 (pkl5)中克隆到 了整联蛋 白173亚基 的基 因，对其核苷 酸序列和推导的氧基酸序列以及 蛋 白结构进行 了分析并与真核表达载体 pCDNA3．1(+)相连接。结果 猪整联蛋 白口3亚基 基因的编码 区含有2355个核苷酸 ，编码 785个氧基酸残基 ，其信号肽 由22个氧基酸组成 ；胞外域 由692个氯基酸组成 ，台有 8 潜在 的糖基化位点(NXS／NXT)和 57个半胱氡酸 (Cys)残基；跨膜 区由29个氨基酸组成 ；胞浆域由41 氧基酸组成 。猪 B3基因与羊、人 、马、犬 、家鼠和挪威大鼠此基IN核苷酸序列的同源性分别为 94．3 、90．1 、92．1 、90．9 、86．1 、86．2 ， 推 导氧基酸序列 的同源性分别 为 95．0 、91．8 、92．5 、91．7 、88．8 、88，7 。结论 通过 生物学软件分析 发现猪 口3亚 基形成复杂的2、3级结构 ，其 中1_22位、715743位氯基酸 区段疏水性较强，兮别是该亚基的信号肽和跨膜 区，以及成功构建 了B3亚基的重组真核表达载体 pCDNA3．1(+)口3。 关键词 ：口蹄疫病毒；受体 ；猪整联蛋 白p3基NI；分子特征 ；序列分析 中图分类号 ：R378 文献标识码 ：A MolecularcloningandcharacteristicsofcDNA porcinep3subunitforFMDVreceptor Iu Zhan—lu。WANGGuang—xiang，SHANGYou—jun，LIU Xiang—tao (N “(?“ZF0o “卵 M J[“thDi ⅡseR ，CFC~ICCLaboratory，~tateKeyLaboratoryoJ~eterinaryEtiohJ (alBiJh『Jgy KPyLabor∞t(ry(1jA?HmalVirology ，fth Mi，Hstryo Agriculture，lun2ho“VeterinarYRese(2rh‘Institut， (?hineseA(ademy (j，AgricultureS(、iences，Lanzhou730046，China) ABSTRACT：Footandmouthdiseasevirus(FMDV)hasbeenshowedtouse4integrinsincludingdVB1，dVp3，dVB6andqV8 asreceptorstoinitiateinfection．Theaim wastolayafoundationforunderstandingtheinteractionofFMDV withreceptor．In thisstudv，wefirstlymolecu1arlyclonedpigintegrinB3from RNAofnormalPK15cell，andcompareditwiththep3geneof otheranima1savailableinGenBankatnucleotideandaminoacidlevels．Thedigestedandpurifiedp3geneofptgwereclonedn toeukaryoticexpressionvectorpCDNA3．1(+ )．The2，355bpcDNA ofporcineintegrin芦3encodedapolypeI~tideof785a minoacidsconsisting。fa22residueputativesignalpepti