安卡鸡tlr4 基因外显子2 多态性及其与经济性状的联系分析.pdfVIP

2011年 第47卷 第5期 GeneticsandBreeding·遗传育种 安卡鸡 基因外显子2多态性及其 与经济性状的关联分析 1 1 1 1 1 1 刘 艳 ，常国斌 ，包文斌 ，王克华 ，张学余 ，陈国宏 （1.扬州大学动物科学与技术学院，江苏扬州 225009；2.中国农业科学院家禽研究所，江苏扬州 225003） 摘 要：研究采用PCR-SSCP对安卡鸡 基因外显子2多态性进行检测，并分析其多态性对经济性状的影 响。结果表明：安卡鸡 基因存在AA、AB和BB3种基因型，基因型频率分别为0.3143、0.4000和0.2857，等位 基因A、B的频率分别为0.5143和0.4857。χ适合性检验表明，安卡鸡 4基因外显子2等位基因的分布处于 2 Hardy-Weinberg平衡状态。序列分析结果显示， 基因外显子2的114bp和 142bp处各有 1个G/A突变， G114A为沉默突变，没有引起氨基酸改变，G142A为错义突变，氨基酸由谷氨酸转变为赖氨酸。分析这3种基因型 与安卡鸡一些重要经济性状间的关联性，表明，3种基因型个体间的生长发育性状、屠宰性状以及常规肉质等重要 经济指标差异不显著，安卡鸡 4基因外显子2对重要经济性状没有显著的影响。 关键词： 基因；抗性基因；经济性状；鸡 中图分类号：S831.2 文献标识码：A 文章编号：0258-7033（2011）05-0001-04 Toll-like受体（toll-likereceptors,TLRs）发现源 苷酸多态性进行检测，了解 4等位基因在群体 于果蝇Toll蛋白，它除参与调控胚胎果蝇背腹侧极 中的分布情况，并分析其多态性对生长发育性状、屠 性形成外，直接介导果蝇对微生物感染产生天然（固 宰及常规肉质等一些重要经济性状的影响，以期为 有）免疫反应。自报道TLRs至今，已在哺乳动物(人 今后制订抗病育种方案提供指导和参考依据。 和小鼠)中发现TLRs的 13种成员 TLR1～13，在人 材料与方法 类和多种动物病原菌的PAMP（病原相关分子模式） [1，2] 识别中起着关键作用 。 1.1 实验材料与性状测定 实验用安卡鸡70羽采 Toll-like受体在机体激活固有免疫和诱导适应 自中国农业科学院家禽研究所，公、母基本各半，按 性免疫的防御机制，特别是在先天性固有免疫中起 常规方法进行饲养管理，每2周测定 1次体重。饲养 着重要作用。在TLRs庞大家族中，人们的兴趣主要 至 12周龄，按全国家禽育种委员会 1984年颁布的 集中在TLR4研究上，它是细菌脂多糖 LPS识别的 “家禽生产性能与计算方法”进行测定体尺和屠宰性 主要受体，并识别许多革兰氏阴性病原菌、衣原体、 能，并测定常规肉质。 螺旋体和病毒等病原微生物，其受体基因的遗传差 1.2 DNA提取 翅静脉采血0.4mL，肝素钠抗凝， [3-4] 异可造成机体对多种病原体抵抗力不一 。 加裂解液4mL，用酚-氯仿抽提法提取基因组DNA， 目前国内、外关于鸡 基因对疾病的抗性/ 溶于TE中，4℃冷藏备用。 易感性的研究相对较少，而且鸡 基因对重要 1.3 引物设计 根据GenBank鸡 4基因 （登录 经济性状的遗传效应还不甚清楚。安卡鸡原产于以 号AY064697）外显子2序列设计引物，上游引物序列 色列，