小麦与叶锈菌互作过程中H2O2的分布及其代谢相关酶基因的表达分析.pdfVIP

分类号： Q窆垒2：鱼 单位代码： 10086 密级： 公珏 学 号： 2010084 小麦与叶锈菌互作过程中H202的分布 及其代谢相关酶基因的表达分析 distributionof and Dynamic H202the geneexpression ofits metabolism·-relatedthe analysis enzymesduring interactionbetween wheatandleafrust 学位申请人：王鑫 指导教师：王冬梅教授 学科专业：植物学 学位类别：理学硕士 授予单位：河北农业大学 答辩日期：二。一三年五月三十一日 III Illl |IIIIllI IllIlllllUIlll Y2387089 摘要 aestivum L．)与叶锈菌(puccinia 过药物学试验证明H202爆发与寄主细胞的程序性死亡有关。为了进一步探究该体系中 H202的时空分布特征及其来源，本试验以小麦品种洛夫林10(L／O)为材料，与叶锈菌 分别借助光学显微镜及透射电子显微镜来观察叶锈菌侵染过程中H202的时空分布特点， 并通过RT-PCR技术对H202产生过程和清除过程相关基因的表达进行分析，以期在转录 水平对I{[202产生的分子机制进行初步探讨。主要结果如下： l、利用光学显微镜观察了小麦与叶锈菌互作过程中，不同亲和性组合中H202在组 织水平的分布特征。试验结果表明互作前期oh到12h不亲和组合和亲和组合的H202 分布没有差异，H202主要集中在侵染点处的保卫细胞上，但在不亲和组合中H202的产 生量多于亲和组合。互作后2411不亲和组合在侵染点处被侵染的叶肉细胞中分布有少量 胞中有少量的H202分布。亲和组合在接种后期始终没有观察到H202染色。 2、利用电镜技术观察了小麦与叶锈菌互作过程中，不同亲和性组合中H202在亚细 胞水平的分布特征。试验结果表明在接种后4h无论不亲和组合还是亲和组合中在菌的侵 染点处即附着胞的下方保卫细胞壁和叶肉细胞的壁上均有H202分布，且不亲和组合中 H202的量比亲和组合多；在接种后8h不亲和组合中叶锈菌成功发育形成气孔下泡囊，在 下泡囊上有大量的H202分布，并在侵染点处保卫细胞和叶肉细胞壁上也有大量H202分 布，而亲和组合中无论是在气孔下泡囊上还是在叶肉细胞壁上都没有发现H202的分布现 象；在接种后12h，无论亲和组合还是不亲和组合中在初生菌丝及其周围的叶肉细胞上 都没有观察到H202的分布；在接种后24．72h，不亲和组合中在菌形成的吸器母细胞、吸 器以及败育的吸器及其接触的发生HR的叶肉细胞及壁上分布有较多的H202，且其周围 的健康细胞壁上也有H202上分布，而亲和组合中无论在菌的不同发育结构上还是寄主细 胞上均没有观察到H202。 达可能是导致H202产生与清除失衡的主要原因，使得该互作过程中呈现出H202的大量积 而没有发生氧爆发。 综合以上结果我们初步推测小麦与叶锈菌互作过程中产生的H202主要来源于寄主 细胞的细胞膜和细胞壁；在互作早期产生的H202可能主要发挥信号作用诱发寄主细胞 产生一系列防御反应，而后期产生的H202直接参与对菌的杀戮作用和对寄主细胞发生 FIR的促进作用，同时作为信号物