XIAP基因在骨髓瘤患者中的表达及临床意义.pdfVIP

：2011年第 24卷第 4期 JofRadioimnmnolo~2011．24(4 ．-——459 ．．—— [7]丁逵，藏宏 ．肺癌组织中骨桥蛋 白的表达及意义 [J]．交通医学， andosteopontinintumorbiology[J]．CritRevOneog，2000，11(2)： 2008，22(6)：665-666． 135—146． [8]ShijuboN，UedeT，KenS，eta1．Vascularendothelialgrowthfactor (2011—05—26收稿) XIAP基因在骨髓瘤患者中的表达及临床意义 任玲君 范 剑 谢军军 童 向民 多发性骨髓瘤 (multiplemyeloma，MM)是浆细胞 的恶性 为内参照。PCR结果进行 2％琼脂糖凝胶 电泳，紫外光凝胶 肿瘤。骨髓 内肿瘤性浆细胞增生 ，常侵犯多处骨组织 ，引起 成像系统观察结果。 多发性溶骨性病损。MM病变为多发性 ，常引起多处骨组织 1．2．4 Western—blot检测 XIAP蛋 白表达：用全细胞蛋 白质 破坏，可累及骨骼系统的任何部位。x连锁凋亡抑制蛋 白 抽提试剂盒(美国ActiveMotif公司产品)提取全蛋 白质和核 (X—linkedinhibitorofapoptosisprotein，XIAP)是凋亡抑制蛋 蛋白质 ，于紫外分析仪 (BeckmanDU640)上测定各样 品蛋 白 白(IAP)家族的一员 J。在 已经发现的 IAP家族成员中， 质含量 (Bradford比色法 ，美国Pierce公司)。取40tzg蛋 白质 XIAP被认为是作用最强的一种 ，可直接抑制凋亡起始因子 样品加上样缓冲液煮沸变性后 ，进行 10％SDS—PAGE，并转 caspase-9和效应分子 caspase一3、easpase-7的活性，并通过其 移至硝酸纤维素膜 (0．45m，SS)，用含 5％BSA(Sigma)的 他多种信号途径参与抑制 内源或外源性凋亡诱导信号引起 PBS(pH8．0)封闭 lh，分别加入抗人 XIAP抗体，以及抗人 的细胞凋亡 J。研究显示，XIAP在多种肿瘤细胞中高表 B一肌动蛋 白抗体 (1：2000，SantaCruz)，于杂交炉 (Hybaid) 达，其表达水平与肿瘤的侵袭性及预后关系密切 。本文检 中37℃滚动反应2h；洗膜 3次每次5rain，加辣根过氧化物酶 测了MM 中XIAPmRNA和蛋 白表达情况，并分析了XIAP表 (HRP)标记的二抗 (1：5000，SantaCurz)，室温反应 2h；洗膜 达与MM治疗反应的关系。 后作 ECL化学发光 (SuperSignalWestDurakit，Pierce)，x片 (Kodak)曝光显影。胶片作激光密度扫描，结果以XIAP对 1 资料和方法 应的 一肌动蛋白的密度积分 比值表示相应蛋白质表达水平 1．1 对象 采集萧 山区第四人 民医院血液 内科 2008年 1 高低。 月 ～2010年 12月53例(男 33，女20)MM确诊病例 ，男女之 1．4 统计学处理 分别采用 检验、t检验及单 因素方差 比为 1．65：1，年龄30岁一8l岁，平均6l岁。按照国际分期 分析对 XIAPmRNA和蛋 白在 MM细胞及不 同细胞类型中表 系统 (ISS)，I期 11例，Ⅱ期 23例，Ⅲ期 l9例 J。所有病例 达的阳性率及强度结果进行统计学分析。 均经过骨髓细胞形态学、免疫表型、染色体、组织活检、血清 免疫球蛋 白测定、血和尿蛋 白电泳、血和尿轻链检测、血清 2 结果 B：一m定量、固相免疫 电泳、肝肾功能、血糖、血脂、骨骼 x片