雷公藤以芽繁芽组织培养研究.pdfVIP

第 29卷 第 1期 西 南 林 学 院 学 报 V01．29 No．1 2009年2月 JOURNAL OF SOUTHWEST FORESTRY UNIVERSITY Feb．2009 雷公藤以芽繁芽组织培养研究 刘希华 一，曾淑兰 ，丁昌俊 ，邢建宏 ，梁一池 (1．南京林业大学森林资源与环境学院，江苏南京210037；2．三明学院，福建三明365004； 3．北京林业大学 林学院，北京 100083) 摘要：以雷公藤茎段为材料，用正交试验设计来寻找其组织培养的最佳配方，结果表明：芽段在Ms +NAA0．01mg／L培养基 中，可萌动产生新叶和新芽；在增殖培养中，以1／2MS+6一BA lmg／L+ NAA0．2mg／L组合月增殖系数最大，达 5．38，且芽生长最好；在生根培养中，以1／2MS+ABT一1 0．6mg／L+IBA0．3mg／L的生根率最高，达80．8％。 关键词：雷公藤；以芽繁芽；组织培养；正交试验 中图分类号：Q943．1 文献标识码 ：A 文章编号：1003—7179(2009)01—0035—04 雷公藤 (TripterygiumwilfordiiHook￡)，又名 1 材料与方法 黄藤根、断肠草、菜虫药、南蛇根、三棱花，旱禾花 等，属卫矛科 (Celastraceae)雷公藤属 (Tripterygi— 采用三明地区经过选优的300株雷公藤扦插 m)攀缘藤本植物。雷公藤的根、叶、花、果均可人 苗，以芽为诱导材料。采 回的枝条 自茎尖开始按 药 ，是治疗类风湿病 、肾炎、外科皮肤病及癌症等 1．2～1．5em剪取芽条，外植体消毒过程为：洗衣粉 多种疾病 的重要野生传统地道 中药材。 《本草纲 +灭菌净溶液— ．1％多菌灵溶液一流水冲洗 1．5h 目》一书中载有此药 。雷公藤 四季开花，夏秋两季 - - ,0．4％的灭菌净溶液— O％乙醇— ．1％升汞溶液 芳香浓郁，春冬两季微有香气。四季栽培 ，可美化 一无菌的0．1％CaCI，溶液。 环境 I3J。近年来，随着市场对雷公藤原料需求的 接种时，芽以形态学下端插入培养基 中并注意 日益增长和野生资源的 日益枯竭，雷公藤的资源 防止芽原基接触培养基。每瓶接 1个芽段，按标记 培育和合理利用引起 了有关部门和企业 的重视， 分开放在培养室培养，2～3d观察 1次，挑出污染的 开展其快繁技术体系的研究势在必行 ]。据斯金 组培瓶以减少污染源 ，记录结果 。 平等 报道 ，浙江省得恩德制药有限公司2002年 1．1 启动培养试验 在浙江新昌、丽水进行雷公藤GAP基地建设试验， 经过预试验，初步认为在启动培养时，芽主要是 美国国立肿瘤研究所等国外科研单位也在福建泰 靠 自身的营养来支持其萌动，培养基的成分对芽的 宁建立了雷公藤基地。赖呈纯 等以带腋芽的幼 萌动培养并无明显的影响，主要影响因子是外源激 嫩茎段为外植体，研究雷公藤的离体快繁技术 。 素 。因此，本研究在启动培养中对细胞生长素 3个 结果表 明：附加 2．0,~g／LBA和 0．1mg／LIBA的 水平和细胞分裂素2个水平进行试验，设计见表 1。 MS固体培养基可诱导腋芽萌发，诱导率达 95％； 每瓶 1个芽，每处理50瓶，3次重复。1个月后，调 附加 3．0mg／LBA和0．1mg／LIBA的Ms固体培 查芽萌动的情况 。 养基为适宜的芽苗继代增殖培养基，增殖率可达 表 1 雷公藤启动培养因素与水平 5．21，但未涉及到生根