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in and 8lophysics，2006，33(10)：942,-947 生物化学与生物物理进展ProgressBiochemistry www．pibb．ac．ca Pifll! 多肽分子疏水性的电喷雾 飞行时间质谱法快速测定术 周跃明1’ 王伟萍1’ 梁华正1’ 张燮1’ 陈焕文1，2)”陈兰慧3) f1)东华理工学院应用化学系，抚州344000：≈吉林大学化学学院，长春130021； 3)东北师范大学化学学院功能材料化学研究所，长春130024) 摘要疏水作用是决定生物分子的结构和性质的重要因素，特别是在蛋白质的折叠，药物分子与受体(蛋白质、DNA等)的 相互作用中起着关键作用．分子疏水性的强弱决定于分子内非极性基团的含量．在一定的实验条件下，电喷雾所获得的信号与 多肽分子内非极性基团的面积呈现良好的相关性．因此，采用电喷雾飞行时间质谱法，在数分钟之内快速测定了不同多肽之 间的疏水性，所获得结果与色谱法结果一致． 关键词疏水性，多肽，电喷雾，质谱，非极性面积 学科分类号065，Q5，Q6 疏水性是影响生物大分子构效关系、生物活性 述【922]，认为此方法存在模型较为繁琐且通用性不 和药物活性的重要参数之一[1~71，也是影响遗传和好、实用性较差等欠缺．最近Hessa等团】用基因工 变异的关键因素【8】，甚至是疯牛病、老年性痴呆等 程合成不同氨基酸序列的多肽，根据多肽插入内质 许多蛋白质构象病的根本原因[91．多肽是一类具有 网膜中的能力，用实验方法给出了20种氨基酸残 重要生物功能的化合物，不仅充当了氨基酸和蛋白 基的疏水性数据，该方法仍然较为复杂且实用性 质之间的桥梁，也是蛋白质测序中能够测定的直接 欠佳． 对象，还是许多正蓬勃发展的生物制药中的重要物 本文首次提出了利用电喷雾飞行时间质谱法进 系【lo】．因此，对多肽疏水性的快速测定对生命科学 行多肽疏水性测定的快速方法，并对疏水性不同的 研究和药物开发均具有特别重要的意义． 多种多肽进行了测定，所获得的结果与经典色谱法 对于生物分子而言，分子疏水性主要决定于分 获得的结果一致．由于电喷雾质谱法已经成为生命 子中含有极性和非极性基团的相对含量．目前常使 科学研究中不可或缺的工具，所以本方法具有普遍 用化合物在正辛醇和水两相间的分配系数的对数值 的适用性，同时具有测量速度快、适合大批量样品 分析等特点． (LogP)来度量其疏水性[11～191，或通过亲／疏水作图 法(hydropathy)描述刚，但实际测量时操作繁琐、耗 1材料与方法 时费力，难以满足实际测定的需要．为了克服这些 实验方法效率低下的缺点，人们又试图仅从化合物 实验所用主要仪器为电喷雾四极飞行时间质谱 的结构出发来预测其脂水分配系数，已有多种计算 仪(ESI-QTOF 用喷雾电压为+3kV，多肽溶液的流速为2 方法见诸报道[1l～131．计算的方法对于普通的小分子 I上l／min， 有机化合物能给出较好的结果，具有重要的意义． 其他条件采用仪器推荐工作条件．所有操作参数在 但是，目前预测一般有机化合物脂水分配系数的方 实验过程中保持不变． 法对于多肽尚不能给出满意的结果．Heiden等12·】花 费了大量精力来合成许多小肽，并测定其脂水分配 +国家自然科学基金，欧盟Simon基金(HWC 2006)资助