HPLC-ELSD测定鸡蛋中胆固醇的含量.pdfVIP

囫分析黑试 2009。voI．26No3亿Chemist与生物Z呈 ry BiOengineem g HPLC—ELSD测定鸡蛋中胆固醇的含量 王术玲 ，郑夏生 ，黄敏娜 ，黄孟秋 ，冯燕兰 。梁 亮 (广州中医药大学，广东 广州 5l0006) 摘 要 ：应用高效液相色谱一蒸发光散射检测器 (HPIC—ELSD)对不 同种类鸡蛋 中胆 固醇的含量进行测定 。采用 C。色谱柱为 固定相 ，以甲醇为流动相 ，流速为 1mL ·min ，柱温为 25℃ ；蒸发光散射检测 器的氮气流速 为 2I ·min ， 漂移管温度为85℃。结果表 明，胆 固醇进样量在 4．OO8～4O．O8O g范围内，其对数与峰面积的对数呈良好的线性关系， 相关系数 R—O．9991，低 、中、高三个浓度 回收率为 95．4 ～99．1 。该方法操作简便 、快速 ，精密度好 ，结果准确可 靠。 关键词 ：高效液相色谱 一蒸发光散射检 测器；鸡蛋；胆固醇；含量测定 中图分类号：0657．72 文献标识码 ：A 文章编号 ：1672—5425(2。09)O3—0O76—03 胆 固醇是环戊烷骈 多氢菲的衍生物 ，亦称 “胆 甾 子分析天平 ，Sartorious公司。 醇”，是动物体内维持正常生理活动所必需的最重要的 1．2 方法 固醇，通常 以游离状态或酯化状态存在于动物组织 1．2．1 对照品溶液的制备 中 ]。但是人体内过多的胆 固醇将引起高血脂 ，进而 取胆 固醇标准品适量 ，精密称定 ，加甲醇溶解 ，制 引发动脉粥样硬化、高血压、冠心病等一系列心血管疾 成 2mg·mL 的溶液 ，即为对照品溶液 。 病 ]，因此控制饮食中胆固醇摄入量非常必要。鸡蛋中 1．2．2 供试品溶液的制备 ． 含有大量的胆固醇，是人体摄入胆固醇的重要途径。对 参照文献[4]，取鸡蛋称重 ，除去蛋清，称取蛋黄总 于鸡蛋中胆固醇含量的测定，文献报道多 以在 208nm 质量 ，计算蛋黄相对质量 。取蛋黄 6g，精密称定 ，置 波长处紫外检测为主，对流动相的要求高，且样品中高 10mL量瓶中，加蒸馏水溶解并定容 ，混匀，得蛋黄稀 紫外吸收物质的干扰大，易造成基线不稳，如果梯度洗 释液。精密量取蛋黄稀释液 1mL于 5mI离心管中， 脱则会引起基线漂移，使得胆固醇定量难度较大_3]。作 加入含 2．0mol·L KOH 的乙醇溶液 1．0mL，振荡 者在此采用高效液相色谱一蒸发光散射检测器，测定了 混匀 ，置 55℃水浴 中皂化 3Omin(每隔 5min振摇 1 不同品种鸡蛋中胆固醇的含量 ，结果令人满意。 次)后取出，经流水冷却 ，加人正 己烷 ：异丙醇 (4：1) 2．0mL，混匀后 3OOOr·min 离心 3min，吸取上清 1 实验 液于蒸发皿中，重复萃取 4次 ，挥干，残渣用甲醇溶解 1．1 材料 、试剂和仪器 并定容至 1mL，用 0．45“m微孔滤膜过滤 ，取续滤液 ， 母婴蛋、无公害山鸡蛋、真土鸡蛋、初生营养蛋 ，昆 即得供试品溶液。 明华曦牧业集团有限公司。 1．2．3 色谱条件 胆固醇标准 品(纯度 99 )，Sigma公 司；甲醇 色谱柱 ：DikmaDiamoni1TM (钻石)一cl8(5 “m， (色谱纯)，Merck公司；其余试剂均为国产分析纯；蒸