PCR技术在流脑诊断中的应用.pdfVIP

第 27卷第 1期 实 验 与 检 验 医 学 2009年 2月 EXPERIMENTAL AND LABORATORY MEDICINE · 实验研究 · PCR技术在流脑诊断中的应用 杨 梦，袁 辉，徐晓倩 陈福辉，熊长辉，梅家模 f江西省疾病预防控制中心 330029) 摘 要：目的 比较传统病原分离方法与PCR技术在流脑诊断中的作用。方法 采集医院疑似流脑病例的脑脊液(CS 或血液 标本．进行流脑病原菌的分离培养、鉴定与聚合酶链反应(PCR)。结果 46例疑似流脑病例标本用传统的培养方法检出l1株 流脑菌株。用PCR方法检出23个标本含有脑膜炎奈瑟菌特异性核酸片断f其中包含 l1份病原分离阳性的标本)。结论 PCR 方法在流脑实验室诊断中其阳性率比传统的病原分离方法高．PCR方法可用于流脑早期辅助诊断方法之一。 关键词 ：流行性脑脊髓膜炎：分离培养 ；聚合酶链反应 中图分类号R512．3．R378：1~5。R446．5 文献标识码A 文章编号 1674—1129(2009)01～0051—02 doi：10．3969／iissn．1674一l129．2OO9．0l 流行性脑脊髓膜炎f简称流脑)是由脑膜炎奈瑟 R：5’-gca - 3’ 菌引起的急性呼吸道传染病 ，起病急，病情发展快 ， 4)SiaD(C)F：5’-t - 3’ 是危害人类的呼吸道传染病之一。及时准确的诊断 R：5’-caatcacgatttgcccaattgac-3’ 对流脑的治疗、预防、疫菌的研究至关重要。流脑的 5)SiaD(Y)F：5’ctcaaagcgaaggctttggtta-3，’ 实验室常规诊断方法是从脑脊液 (csr3和血液 中分 R：5’-ctgaagcgttttcattataattgctaa一3’ 离病原菌，但使用抗生素治疗后，病原分离的阳性率 6)SiaD(WI35)F：5’-cagaaagtgagggatttccata一3’ 明显下降fl1。PCR技术以其灵敏、快速、特异的特点， R：5’-cacaaccattttcattatagttactgt-3’ 作为诊断技术已得刘较广泛的应用 此方法可以快 1-3 主要仪器 PCR扩增仪(MJ1、凝胶成像仪 、电 速检测不同标本 中的极少量细菌．其灵敏度可达到 泳仪 10—12gDNM50 体系2【】。而且抗生素 的应用对它的 1．4 方法 检出影响不大。并且在接到标本后 3～4小时即可做 11．4．1病原分离方法 出诊断 。可以在疾病的早期辅助临床诊断 ．弥补传统 1．4．1．1脑脊液标本 无菌采集脑脊液fCSF)2mL 方法的不足 ‘ 于无菌试管中．保温状态下尽快送往微生物实验室． l材料与方法 离心5000dmin，5min．取沉渣接种一块巧克力平板 ． 1．1标本来源 各设区市医院收集 的疑似流脑病 37~(25％CO 培养 24～48小时，每 日检查细菌生长的