小麦赤霉病拮抗菌P72抗菌物质的分离纯化和性质研究.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiA ．Sci．2009，37(6)：2576—2577，2597 责任编辑 陈娟 责任校对 吴晓燕 小麦赤霉病拮抗菌 P／2抗菌物质的分离纯化和性质研究 裴韬，任大明，石皎 (沈阳农业大学生物科学技术学院，辽宁沈阳l1叭61) 摘要 [目的]研究小麦赤霉病拮抗菌P72的抑菌活性及稳定性。[方法]将Bacillussubtil~P72接种于发酵培养液中，接种量5％，28 摇床培养48h后，8000r／min，离心10nfin取菌株发酵离心所得上清液进行分离纯化、遗传稳定性、热稳定性及酸碱稳定性测定。[结 果]P72菌株发酵上清液经过盐析、透析后进行DEAE-52离子交换层析，用0．5mol／LNaC1溶液洗脱的蛋 白对小麦赤霉病菌的拮抗能力 最强。SDS—PAGE电泳显示具有抗菌作用的蛋白分子量约为4J0kD。经过稳定性的试验测定，该抗菌物质的拮抗活性具有遗传稳定性， 在60℃有较高的稳定性，无菌液对酸具有稳定性，在碱性溶液中不具有稳定性。[结论]小麦赤霉病拮抗菌P72对小麦赤霉病菌的拮抗 能力较强，抗菌活性较稳定，且热稳定性较好 ，有广阔的开发前景。 关键词 小麦赤霉病；抗菌物质 ；分离纯化 中图分类号 S188 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(2009)06—02576—02 StudyonPropertyandPurificationofAntagonisticBacteriaP72againstW heatScab PEITaoetal (BiologicalScience＆TechnologyCollege，ShenyangAgriculturalUniversity，Shenyang，Liaoningl10161) Abstract l0biectivelTheantibacterialactivityandstabilityofantagonisticbacteriaP72againstwheatscabwerestudiedintheexperiment． 1MethodITheBacillussubtilisfy72wasinoculatedinfermentationcuhureandtheinoculationamountwas5％．TheBacillus subtilisP72was culturedonshakingtableat28℃ for48handcentrifugedat8000r／rainofr10min．Thesupernatantoffennentationbrothwaspurifiedthen itwasdetectedgeneticstability，thermalstabilityandpHstability．1ResultlThesupernatantoffermentationbrothofP72strainwasconducted DEAEI52 ionexchangechromatographyaftersalting．outanddialysisandtheproteinwhichwaselutedby0．5mol／LNaC1solutionpossessed thestrongestantagonisticabilityagainstwheatscabpathogen．TheSDSelectrophoresisshowedthatmolecularweightofproteinwithan- tibacterialeffectwas40kD．Throughthestabilitytest．theantagonisticactivityofthisantimicrobialsubstancewasheritable．At60 ℃ ．the sterileliquidwasstableinacidicsolutionandunstableinalkalinesolution．1ConclusionlTheantagonisticbacteriaP72hadstrongantagonistic abilitytowheatscabpathogen andstableantibacterialactivityaswellasthermalstability．soitwouldpossessawidedevelopmentprospect． Keywords Wheatscab：Antimicrobialsubstance：Purification 小麦赤霉