条锈菌诱导的小麦病程相关蛋白TaPR10基因的克隆及特征分析.pdfVIP

中国农业科学 2009,42(1):110-116 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.01.013 条锈菌诱导的小麦病程相关蛋白 TaPR10 基因的克隆及特征分析 1 1 1 1 1 1 1 1,2 张 岗 ，李依民 ，张 毅 ，董艳玲 ，王晓杰 ，魏国荣 ，黄丽丽 ，康振生 1 2 （西北农林科技大学植物保护学院，陕西杨凌 712100 ； 陕西省农业分子生物学重点实验室，陕西杨凌 712100 ） 摘要：【目的】克隆条锈菌诱导的小麦病程相关蛋白PR10 基因，研究其在小麦成株抗条锈病防御反应中的作 用。【方法】采用电子克隆、RT-PCR 技术，从条锈菌侵染的小麦兴资 9104 中，分离病程相关蛋白 10 基因；采用 生物信息学技术预测分析该基因的DNA序列结构及其编码蛋白的保守域及基本特性；利用实时荧光定量RT-PCR技 术，分析该基因在小麦成株期和苗期受条锈菌 CYR32 侵染后的表达情况。【结果】分离到病程相关蛋白 10 基因， 命名为 TaPR10，ORF 长 483 bp，编码由 160 个氨基酸组成的蛋白质 TaPR10；TaPR10 不含跨膜区、无信号肽、定 位在胞内，除具有典型的病程相关蛋白 Bet_v_I 家族保守结构域外，还有其它 4 类功能保守域；与小麦、高粱、 玉米和水稻等4种植物PR10 蛋白的氨基酸序列相似性在80%左右；TaPR10 DNA序列内部存在188至271位84 bp 的内含子序列，其拼接位点序列具有GT-AG双核苷酸序列；TaPR10 基因表达分析的结果表明，TaPR10 基因在成株 期和苗期反应中表达量均上调，成株期表达高于苗期。【结论】首次分离到一个条锈菌CYR32诱导的小麦 TaPR10 基因，该基因可能参与了小麦成株抗条锈病防御反应。 关键词：条锈菌；病程相关蛋白；表达模式；基因克隆；电子克隆 Cloning and Characterization of a Pathogenesis Related Protein Gene TaPR10 from Wheat Induced by Stripe Rust Pathogen 1 1 1 1 1 1 1 ZHANG Gang , LI Yi-min , ZHANG Yi , DONG Yan-ling , WANG Xiao-jie , WEI Guo-rong , HUANG Li-li , KANG Zhen-sheng1,2 1 ( College of Plant Protection, Northwest Agricultural and Forestry University, Yangling 712100, Shaanxi; 2Shaanxi Provincial Key Laboratory of Molecular Biology for Agriculture, Yangling 712100, Shaanxi) Abstract: 【Objective 】 A stripe rust pathogen induced PR10 gene from wheat was isolated to better un