草鱼呼肠孤病毒GCRV-GD108株VP5蛋白功能及免疫原性分析.pdfVIP

第 卷第 期 水 产 学 报 年 月 文章编号 草鱼呼肠孤病毒 株 蛋白 功能及免疫原性分析 王杭军 叶 星 田园园 张莉莉 邓国成 中国水产科学研究院珠江水产研究所农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室广东 广州 上海海洋大学水产与生命学院上海 摘要 在前期研究中分离到一株草鱼呼肠孤病毒 并获得其全基因组序 列 该病毒株的 基因编码 蛋白该蛋白与哺乳动物正呼肠孤病毒 蛋白具有 较高的同源性及相似的结合保守区域推测 蛋白也同样具有 活性 为检测 蛋白是否具有 活性及其是否具有免疫保护作用采用已构建的原核 表达载体表达 重组蛋白通过孔雀绿钼酸铵法检测纯化后的重组蛋白的活 性 采用 软件预测 基因编码蛋白的抗原性综合蛋白亲水性表面可及性与 表面抗原性三项指标预测编码蛋 白可形成抗原表位的氨基酸区域数多达 个提示 蛋白具有较强的免疫原性 用重组蛋白 免疫健康草鱼通过人工攻毒实验检测 蛋白的免疫保护作用 结果显示 重组蛋 白具有 活性且其 活 性依赖于 或 而 的存在可能抑制其活性 蛋白可诱导草鱼产生高 水平的抗体滴度并显著提高 的表达水平但未能为草鱼提供抗 感染 的保护 研究首次证实 株 蛋白具有 活性但不能为草鱼提供 免疫保护作用 关键词 草鱼呼肠孤病毒 株 重组 蛋白 核苷三磷酸酶 活性 免疫原性 中图分类号 文献标志码 草鱼呼肠孤病毒 列同源性 根据 的氨基酸序列分别进 是水生呼肠孤病毒属 中致 行系统进化关系分析结果显示该株可能为水生 呼肠孤病毒属中的新种且与其它 已知 病力最强的病毒 是引起草鱼病毒性出血病的 主要病原体 本实验室近年分离到草鱼呼肠孤病 种相比与正呼肠孤病毒属 毒广东株 并已获得其全基因组序 的关 系更 近 检 测 显 示 列 与其它水生呼肠孤病毒一样该病毒株的基 株在我国南方草鱼出血病病毒流行株中 因组由 条分节段的双链 具有一定的代表性 组成但不同的是这 条节段编 分析显示 株的 基 码 个蛋白而不是 个蛋白与已报道的其它 因编码蛋白为结构蛋白 此 蛋白与水 草鱼呼肠孤病毒株存在较大的分子差异它与 生呼肠孤