红螯光壳螯虾(Cherax+quadricarinatus)酚氧化酶原基因的克隆与表达分析.pdfVIP

第 卷第 期 水 产 学 报 年 月 文章编号 红螯光壳螯虾酚氧化酶原基因的克隆与表达 王丹丽 左 迪 王兰梅 李嘉尧 赵云龙 宁波大学海洋学院浙江 宁波 华东师范大学生命科学学院上海 摘要 为深入了解红螯光壳螯虾酚氧化酶原 基因的非特异性免疫机制利用 技术从红螯光壳螯虾血细胞中克隆到酚氧化酶原基因 基因 全长为 开放阅读框为 编码 个氨基酸其结构中含有两个铜离子结合位点预 测分子量为 同源性比对结果显示红螯光壳螯虾 与克氏原螯虾酚氧化酶 原的同源性最高为 其次是淡水螯虾 挪威龙虾 美国龙虾 等进化分析发 现 与克氏原鳌虾淡水螯虾挪威龙虾美国龙虾等的酚氧化酶原亲缘关系最近 实验结果表明 在血细胞中表达水平最高其次是肠触角腺鳃等在肝胰 腺中有适量表达 感染后红螯光壳螯虾 在血细胞肝胰腺和鳃组织中 具有不同的时空表达趋势但感染组和免疫后感染组 表达量分别在感染后 和 达到最大值且在 种组织中 个感染组的表达量为对照组的 倍显著高 于对照组 之后 基因的转录水平明显下降 免疫后再受病毒感染的虾 的表达量在 种组织中总体高于感染组感染 后的免疫保护率达到 表明免疫增强剂可使机体的抗病毒能力增强对防御 感染具有一定的免疫保 护作用 关键词 红螯光壳螯虾 酚氧化酶原 白斑综合征病毒 克隆 表达 中图分类号 文献标志码 红螯光壳螯虾 又称 酚氧化酶原 系统 红螯螯虾具有食性杂生长快易养殖等优势是 是甲壳动物最重要的免疫反应体系其 活力 目前世界上较名贵的淡水经济虾之一 我国 的强弱与机体的免疫力直接相关可作为衡量甲 于 年引进试养随着养殖规模的不断扩大及 壳动物免疫功能大小的指标之一 作为甲壳 集约化程度的提高各种养殖病害也日趋影响红 动物免疫系统的重要组分进行酚氧化酶原基因 螯螯虾养殖产业的发展 白斑综合征病毒 结构研究是深入研究酚氧化酶原在体内表达调 是常见的病害之一 控机制和免疫功能等的基础 等 在淡水 自 世纪 年代在全世界爆发以来其宿主范 螯虾 中首次确定 了 围广不仅侵染各种野生及养殖对虾 而且还 的初级结构之后陆续报道了甲壳动物的 涉及几乎所有的水生养殖甲壳类动物 近年 序 列 如 叶星 等 克 隆 了短