中华绒螯蟹精巢特异表达蛋白DMRT-like_抗体制备及免疫鉴定.pdfVIP

第 卷第 期 水 产 学 报 年 月 文章编号 中华绒螯蟹精巢特异表达蛋白 抗体制备及免疫鉴定 邱高峰 陈 洁 上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海 摘要 是性别调控因子和 的相关基因近年报道了中华绒螯蟹 只在精巢中表达为了验证蛋白是否在中华绒螯蟹精巢中特异表达及其功 能根据中华绒螯蟹基因序列构建重组质粒转化大肠杆菌 经融合表达和分析表明融合蛋白主要以包涵体形式存在分子量约为 利用 柱亲和纯化融合蛋白免疫家兔制备获得 多克隆抗体 检测表明该抗体既能特异地识别重组蛋白又能特异识别精巢中蛋白 并且该抗体仅在精巢中检测到蛋白的表达分子量约为 为预期单体分子 量的二倍 检测变性后精巢总蛋白该抗体能识别 和 两条条带证 明了二聚体的存在 这一结果暗示可能通过形成二聚体形式调控中华绒螯蟹 精巢发育 关键词 中华绒螯蟹 蛋白 原核表达 抗体制备 精巢分化 中图分类号 文献标志码 基因相 是与果蝇 和 似该基因缺失会导致性反转现象的出现 在 线虫 性别分化基因相关的转录因子广泛 雄性小鼠中 基因敲除之后会导致睾丸分 存在于无脊椎动物和脊椎动物之间 基 化不完全甚至生殖细胞死亡 因家族都包含一个独特的 结合域即 在水产动物研究中 日本研究者已在青 域 这 种 结 构 域 最 早 在 果 蝇 中找到了一个在精巢中特异 的 和 线 虫 表达的含有 域的基因命名为 进一步 的 中发现 它们能以锌指结 研究表明基因的突变会导致青 向雌性方 构与特异的 序列结合通过调控下游基因 向发育证明是青 精巢发育必需的基因 的表达参与性别决定和分化 和 是青 性别决定主效基因