半滑舌鳎生长因子midkine的定点改造及原核表达.pdfVIP

第 卷第 期 水 产 学 报 年 月 文章编号 半滑舌鳎生长因子的定点改造及原核表达 王亚楠 刘旭东 穆琳琳 刘志鹏 李春梅 于海洋 张全启 中国海洋大学海洋生命学院海洋生物遗传学与育种教育部重点实验室山东 青岛 青岛市海洋与渔业局山东 青岛 国家海洋局北海环境监测中心山东 青岛 摘要 为进一步研究半滑舌鳎成熟肽活性与功能对半滑舌鳎生长因子 成熟 肽进行定点改造及原核表达 根据大肠杆菌偏爱密码子的特点实验利用 法对半 滑舌鳎 成熟肽进行定点突变 将改造后的半滑舌鳎成熟肽 克隆到载体质粒 构建原核表达载体 并转化至大肠杆菌 菌株中 结果显示与对照组相比经诱导表达后半滑舌鳎重组蛋白 存在于大肠杆菌上 清液中产物相对分子质量约为 研究表明本实验对半滑舌鳎生长因子成功进行 了定点改造原核表达质粒成功构建并在大肠杆菌中高效表达且主要以可溶形式存在 关键词 半滑舌鳎 原核表达 融合蛋白 中图分类号 文献标志码 是 年由 等 首 长 在癌细胞中阻断其受体也可以限制肿瘤的 先发现的一种新基因是一类新的肝素结合性生长 生长和转移这些研究反向证实了 具有肿瘤 因子与多效营养因子 基因结 生长因子作用 近年来 已经成为恶性肿瘤 构和氨基酸组成非常类似二者同属于家 在内的多种疾病治疗中颇具前景的分子靶点可 族 在小鼠和人中 在胚胎发育时期广泛表 用于恶性肿瘤的临床诊断治疗评价以及抗肿瘤 达出生后表达降低而成体组织中仅在肾脏和多 新药的开发 基于它的应用前景 的蛋白表 种癌细胞中高表达如肿瘤乳腺癌肝癌结肠癌 达及临床研究也因此成为国内外学者关注的焦点 胰腺癌等 然而在斑马鱼 和虹 之一 鳟 中存在两种 和 鱼类中斑马鱼虹鳟异育银鲫 不同于哺乳动物在胚胎发育早期的广泛表 等多个物种的 已被克隆并进 达斑马鱼和 的表达具有空间特异性二 行了初步的功能研究 在斑马鱼胚胎发育过程中 者在胚胎发育时期和成鱼大脑中表达分布均不同 在体节和神经管中部区域高表达影响体节 显示出哺乳动物与鱼类的在功能上可能存在 形成和基板细胞分化而 则表达于神经管背 部区域促进神经嵴细胞生长 异育银鲫 着差异 近年来的研究结果表明 具有多种生物 中 蛋白在胚胎早期广泛分布 体节时 学功能它能促进正常细胞生长和分化尤其是神 定位于一对巨大的神经元上并且注射过量的 可导致异育银鲫脑部发育不全 这些结 经细胞的发育 它可以延长中心神经元的生存