剑尾鱼脑细胞系的建立及细胞色素P4501A的诱导表达.pdfVIP

第 卷第 期 水 产 学 报 年 月 文章编号 剑尾鱼脑细胞系的建立及细胞色素 的诱导表达 王英英 李凯彬 刘 春 王 庆 曾伟伟 石存斌 吴淑勤 中国水产科学研究院珠江水产研究所农业部渔用药物创制重点实验室 广东省免疫技术重点实验室广东 广州 摘要 为了构建剑尾鱼脑细胞系并探讨其细胞色素 基因的诱导效应实验通过 胰蛋白酶消化法对剑尾鱼脑组织进行体外培养经连续继代培养建立了可稳定传代的脑细胞 系命名为 最适培养液为含有 胎牛血清 的 和 等比混合 培养液培养条件为 生长特性研究表明第 代细胞的群体倍增时间为 显示出旺盛的生长和分裂能力 染色体分析发现培养细胞的染色体众数为 条核型 公式为 臂指数 与剑尾鱼一致 诱导实验表明在 的苯并芘诱导下 表达量显著提升且表现出良好的剂量效应关系 脑细胞 系的建立为剑尾鱼的毒理学评价研究提供了便利也为其系统的生态毒理学应用打下基础 关键词 剑尾鱼 脑细胞系 细胞色素 中图分类号 文献标志码 目前鱼类细胞作为毒理学研究和环境污染 细胞色素 酶是机体参与有机污染物代 物评估的工具颇受关注 与体内试验比较以 谢的重要酶系在机体解毒中起重要作用是污染 鱼类细胞系为代表的体外研究体系具均一性好 物早期毒性评价的优良指标 鱼类细胞系经长期 反应条件易于控制与污染物作用直接等特点且 的继代培养细胞功能趋于特化可能导致某些主 可减少生物体自我排毒等整体效应的影响保证 要功能的丧失 研究表明许多鱼类细胞系已不 了研究的可重复性 作为污染物检测以及毒理学 具备表达细胞色素 酶的功能使其在有机污 研究的优良体外系统细胞系已发展成为一种获 染物评价应用中大打折扣 本实验采用胰蛋白酶 普遍认可的检验技术在污染物毒性评价及毒理 消化培养方法获得可稳定传代的剑尾鱼脑细胞 学研究中发挥重要作用 系 研究发现持久性有机污染物可明显诱 鱼类终生生活于水中在污染物环境毒性评 导细胞色素 基因的表达且表 价及效应研究应 用 中具 明显优 势 剑尾 鱼 现出良好的剂量 效应关系 因而剑尾鱼脑细 是其中的优秀代表之一分 胞系或可作为体外毒理学细胞模型应用于持久性 布于墨西哥和危地马拉等地具有体型小繁殖周 有机污染物的毒理学相关研究 期短易饲养等特点且对一些环境污染物敏感 材料与方法 已被推荐作为一种生态毒理学测试的模式实验动 物 国内外至今还未见剑尾鱼细胞系体外检 主要试剂 测环境污染物的研究报道 因此剑尾鱼相关细 胰 蛋 白 酶 胞系的建立对其在生态毒理研究中的系统应用有 培养基均为 公司产品