损伤后血管平滑肌细胞增殖规律的影响.pdfVIP

中国微循环 2005年 8月第 9卷第 4 期 　　　　　 2·51 · 文章编号 : 1007 - 8568 (2005) 04 - 0251 - 05 ·实验研究 · eNO S基因体外转染对大鼠颈总动脉球囊 损伤后血管平滑肌细胞增殖规律的影响 蔡文玮 ,陆 　平 ,盛 　净 ( ) 【摘要 】　目的 　将内皮型一氧化氮合酶 endoth ilial n itirc oxide syntha se, eNO S 基因 ,通过基因工 程技术转染至体外培养的大鼠颈总动脉球囊损伤后的血管平滑肌细胞中 ,观察其对血管平滑肌细胞增 殖规律的影响 。方法 　三月龄雄性 W a star大鼠 20 只 ,分为正常对照组 、空白对照组 、p cDNA 3. 1 ( - )转 染组和 p cDNA 3. 1eNO S转染组 ,每组各 5 只。除正常对照组外 15 只 W a star大鼠,施行经皮冠状动脉 ( ) 腔内成形术 PTCA 。术后一月 ,处死所有 20 只大鼠,取出左侧颈总动脉 , 以组织块贴壁法培养损伤后 血管平滑肌细胞 ,采用脂质体载体 Fugene 6 介导真核表达载体 p cDNA 3. 1eNO S和空载体 p cDNA 3. 1 ( - )分别转染 eNO S转染组和 p cDNA 3. l ( - )转染组的平滑肌细胞 , 以 R TPCR 法 、原位杂交法和免疫 荧光法检测 eNO S基因的表达 ; 以 M TT法检测细胞增殖程度 。结果 　在转染 p cDNA 3. l - eNO S基因的 损伤后血管平滑肌细胞中可以检测出 eNO S mRNA 和蛋白的表达 ,且其细胞增殖程度显著低于未转染 ( ) eNO S基因者 P 0. 05 。结论 　eNO S基因体外转染可以明显抑制大鼠颈总动脉球囊损伤后血管平滑 肌细胞的增殖活性 。 【关键词 】　内皮型一氧化氮合酶 ;转染 ;血管平滑肌细胞 ;经皮冠状动脉腔内成形术 中图分类号 : R331. 3 + 2　　　　文献标识码 : B The Influence of the Va scular Sm ooth M uscle Cell Prolifera tion in Ca theter Injur ied Ra t Comm on Carotid A rtery after eNO S Tran sfection in V itro CA I W enw ei, L U P ing, SHEN G J ing. D ep a rtm en t of Geron tics of the 9 th P eop le ’s H osp ita l Aff licted to S hang ha i S econd M ed ica l Un ivers ity, S hangH a i, 2000 11, Ch ina 【Ab stract】　O bjective　To tran sfect eNO S gene in to the cu ltured vascu lar smooth m u scle cells of the catheter inju ried rat common carotid artery and to ob serve the influence of the tran sfection to the V SMC s. M ethod　20 m ale W astar rats of 3 mon th s old were divided even ly into norm