短芽孢杆菌耐碱性木聚糖酶xylB)分子生物学研究.pdfVIP

短芽孢杆菌耐碱性木聚糖酶xylB)分子生物学研究.pdf

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第 28 卷第 1 期 食 品 与 生 物 技 术 学 报 Vol . 28  No . 1              2009 年 1 月 Journal of Food Science and Biotechnology           J an .  2009 文章编号 (2009) 0 1008605   ( ) 短芽孢杆菌耐碱性木聚糖酶 x y lB 的 分子生物学研究 12 1 1 1 胡春霞 ,  陆平 ,  李卫芬 ,  许梓荣 ( 1. 浙江大学 教育部动物分子营养重点实验室 , 浙江 杭州 3 10029 ; 2 . 绍兴文理学院 元培学院生 命科学系 ,浙江 绍兴 3 12000) ( ) ( ) 摘  要 : 根据已发表的环状芽孢杆菌 B aci l l us ci rc ul an 和枯草芽孢杆菌 B aci l l us s ubt i l is 木聚 ( ) β ( 糖酶基因序列设计引物, 首次扩增出短芽孢杆菌 B aci l l us brev is 中的 1 ,4内切木聚糖酶 以下 简称木聚糖酶 , E C32 18) 基 因片段 。序列分析表 明 , 该基 因与 已登录 的木 聚糖酶基 因 A F490979 1 和 A F490980 1 分别有 97 %和 96 % 的同源性 ,与其它芽孢杆菌属的同源性也较高 。 ( ) ( ) 将此基因片段插入表达载体 p E T30a + 构建重组质粒 ,转化大肠杆菌 E col i BL 2 1 D E3 。重组 基因工程菌破碎后进行 SD SPA GE 电泳检测 ,结果表明 , IP T G 诱导后 ,木聚糖酶基因在大肠杆菌 的胞内获得高效表达 ,且酶活力最高可达 26 14 U/ mL 。重组木聚糖酶最适温度为 50 ℃,最适p H 为 90 。 关键词 : 木聚糖酶 ;克隆;表达 ;大肠杆菌 ;短芽孢杆菌 中图分类号 :Q 55 ; Q 785 ; Q 786 文献标识码 : A Study on Xylanase( x ylB) Gene f rom B acil l us b r evi HU Chunxia12 ,  L U Pin g1 ,  L I Weif en1 ,  XU Zirong1

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