诊断慢性粒细胞白血病的电化学生物传感器的研究.pdfVIP

· 论 著 · 2012年8月第9卷第23期 诊断慢性粒细胞 白血病的电化学生物传感器的研究 刘文伟 张雪燕 习 静 韩跃武 兰州大学基础医学院生化教研所．甘肃兰州 730000 摘【要】目的 建立一种检测慢性粒细胞 白血病 的方法。 方法 此实验在已经筛选 出慢性粒细胞 白血病 (CML)K562 细胞 5个特异性 、结合率较高的核酸适体的基础上 ，构建 了一种检测方法 ：采用两种纳米金属材料分别标记 5个适 体 ，将标记后的 10个适体 ，两两组合与CMLK562同时结合 ，一个作为捕获分子 ，一个作为测定分子与CMLK562结 合后 ，经氧化还原反应将测定分子上的金属转化成离子状态，利用电化学工作站检测对应的电流。 结果 筛选出了 最佳组合 (P2一s3一P1一s5)实现对 CMLK562的检测 ，得到 了检测细胞数 目与DPV电流值的拟合曲线方程。结论 得 到一种检测下限可达到 50个细胞的诊断慢性粒细胞 白血病的电化学生物传感器。 关【键词1核酸适体 ；纳米材料；CMLK562；电化学生物传感器 中【图分类号】R557 文【献标识码】A 文【章编号】1673—7210(2012)08(b)一0014—03 Study0felectrochemicalbiosensorfordiagnosischronicmyeloidleukemia LIUWenwei zHANGXueyan XI ng HAN Yuewu ResearehInstituteofBiochemistry．SchoolofBasicMedicalScience，LanzhouUniversityGansuProvince，Lanzhou 730000， China [Abstract]0bjectiveTocreatamethodofdetectionforchronicmyelocyticleukemia．MethodsAmethodofdetectionhad beenbuilt，basedonanexperimentinlab，duringwhich，5highly—combinedaptamersofCML K562 cellshadbeense— lected．Fiveaptamersweremarkedwith twokindsofnanoparticlesseparately．Thetenmarkedaptamersweredividedinto 20pairsbyeverytwocombination．Inevery pair，theaptamers，OReasthecapturemolecules，theotherthedetermination molecules．werecombinedwithCMLK562cells．ThentheAuatomsweretransformedintothestateofAu—ionbyREDOX reactionsand electriccurrentwassensedbyelectrochemicaldetection．ResultsThebestpairofaptamerswasselectedto detecteCMLK562．thefittedcurveequationtotestcellsnumberandDPV ofcurrentvaluewasobtained．ConclusionGet aelectrochemicalbiosensorwhichcanbeusedtodiagnoseCMLK562cells，withadetectionlimitupto50cells． K【eywords】Aptamers；Nanoparticles；CMLK562；Electrochemicalbiosensor 目前 以适体作为识别元件的生物传感器有光学适体生 经PCR扩增成 5端标记氨基和生物素的双链 DNA。用生物 物传感器、电化学生物传感器、压电石英晶体生物传感器 l-『41。 素一链霉亲和素磁珠 的方法分离 ．获得 5端标记氨基适体4[1。