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时珍国医国药 2011年第 22卷第 11期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2011VOL．22NO．11
小 ，涉及到的样品量也很小，最好使用精密分析天平称取样品；
配制PBS的时间：PBS尽量在临用前配制 ，过夜或配制时间较长
的PBS的酸碱度会发生变化，影响酶的活性；③96孔板的洁净程
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度 ：实验最好使用全新的96孔板。如果是以前使用过的，一定要
：：：：、、、：：、： ，．．．． 确保已经清洗干净 ，否则会干扰实验数据 ；④各组检测时设计 ：应
该充分利用同一块 96孔板中的各孑L，尽量把要比较 的组设计在
1 一一10 15 2o 25 3o 35 4‘
同一板中检测，有利于减少组 间误差。⑤实验中晶体析出的问
题 ：充分溶解的样品加入反应体系后 ，因浓度得到稀释 ，理论上叮
能会有晶体析出，这可能会影响实验结果。目前的实验技术还难
以避免这一问题。如何从技术层面上减少误差来源 ，也是我们将
5％DM5O1F5D 来需要研究的方面。本实验适宜的反应体系为：底物 L一酪氨酸
40 l，酶体积 7O l或以下 ，加入适量 pH6．8缓冲液和受试药
物，使DMSO的终体积分数为 5％，体系总体积为200 l，恒温
— -- 昔鬯尸 ： 只 每 F=自 37℃下孵育20～26min之后检测。今后 ，我们将用这个反应体
一 一
2 … ～ 系对连翘的单体成分进行体外抑制酪氨酸酶活性实验的筛选研
究。
参考文献 ：
[1] 刘锦梅 ，王艳丽，潘 维．4种茶叶醇提物对酪氨酸酶的抑制作用
[J]．现代食品科技，2009，25(6)：610．
图3 DMSO对不同浓度 FSP和FSD酪氨酸酶活性抑制率的影响 [2] 朴香兰．白芷酪氨酸酶抑制成分研究 [J]．中国中药杂志，2009，34
(9)：1117．
酶实验受环境的影响很大。笔者认为，
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